毛果芸香碱减轻对乙酰氨基酚所致肝损伤的作用及机制研究

摘要

目的 研究毛果芸香碱减轻对乙酰氨基酚(Acetaminophen, APAP)所致肝损伤的作用及机制。方法 采用小鼠腹腔注射APAP建立急性肝损伤模型，将18只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、APAP模型组、毛果芸香碱组，每组6只。毛果芸香碱组小鼠腹腔给药毛果芸香碱(2.5 mg/kg体重)7 d,末次给药1 h后，APAP模型组和毛果芸香碱组腹腔注射APAP(400 mg/kg体重),空白对照组腹腔注射等量生理盐水，APAP注射后12 h处死所有小鼠，采集血液和肝脏等组织样本。血清生化检测仪检测血清肝功指标天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase, AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase, ALT),采用HE染色方法检测肝脏病理评估毛果芸香碱对APAP诱导肝损伤的药效作用；Western blot方法检测肝脏增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases1/2, ERK1/2)蛋白表达，探索肝细胞增殖作用及其可能的机制。结果 与空白对照组比较，APAP模型组小鼠的ALT和AST含量均显著升高(P<0.001),表明APAP模型建立成功；与APAP模型组比较，毛果芸香碱组小鼠血清AST含量显著降低(P<0.01),ALT含量无统计学差异(P>0.05)。HE染色病理学结果显示，与空白对照组比较，APAP模型组小鼠肝脏出现肝小叶中心坏死、肝内出血和细胞核消失或固缩；与APAP模型组比较，毛果芸香碱组小鼠改善了肝小叶中心坏死、肝内出血和细胞核固缩。Western blot结果显示，与空白对照组和APAP模型组比较，毛果芸香碱组小鼠肝脏PCNA蛋白表达水平升高，差异有统计学意义(P<0.01);与空白对照组和APAP模型组比较，毛果芸香碱组小鼠p-ERK/ERK蛋白表达水平升高，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 毛果芸香碱能减轻APAP所致肝损伤，其分子机制可能是毛果芸香碱通过激活肝细胞中m3AchR-ERK1/2信号通路进而促进肝细胞增殖来发挥作用。

关键词

对乙酰氨基酚 / 毛果芸香碱 / 毒蕈碱受体 / 肝细胞增殖