肿瘤相关巨噬细胞PKM2表达对食管癌细胞恶性表型的影响

摘要

目的 探讨肿瘤相关巨噬细胞(Tumor associated macrophages, TAMs)中M2型丙酮酸激酶(Pyruvate kinase M2,PKM2)表达对食管癌细胞迁移、侵袭恶性表型的影响。方法 慢病毒转染PKM2敲低/过表达质粒至THP-1细胞并诱导分化为TAMs,随机分为PKM2敲低组(PKM2 KD组)、PKM2敲低对照组(PKM2 KD NC组)、PKM2过表达组(PKM2 OE组)和PKM2过表达对照组(PKM2 OE NC组)。qRT-PCR检测PKM2及巨噬细胞表型标志物的表达；进一步与食管癌KYSE150细胞共培养后，Transwell实验检测食管癌细胞迁移和侵袭能力变化。将共培养细胞混合接种裸鼠皮下构建裸鼠荷瘤模型，免疫组化检测PKM2和CD163的表达，ELISA检测葡萄糖和乳酸水平。结果 与PKM2 KD NC组相比，PKM2 KD组TAMs细胞内PKM2表达水平显著降低，NOS2表达上调(P均<0.05),CD163轻微下调(P>0.05),CCL5表达下调(P<0.05);与PKM2 OE NC组相比，PKM2 OE组TAMs细胞内PKM2表达水平显著升高，NOS2表达下调(P均<0.05),CD163轻微上调(P>0.05),CCL5表达上调(P<0.05)。共培养后，与PKM2 KD NC组相比，PKM2 KD组KYSE150细胞迁移和侵袭能力均显著下降(P均<0.001);与PKM2 OE NC组相比，PKM2 OE组KYSE150细胞迁移和侵袭能力均显著增强(P均<0.01)。细胞混合接种后，与CO-PKM2 KD NC组相比，CO-PKM2 KD组裸鼠皮下移植瘤体积和重量均减小(P>0.05),瘤体内PKM2和CD163表达下降(P均>0.05),血清葡萄糖和乳酸水平显著下降(P均<0.05);与CO-PKM2 OE NC组相比，CO-PKM2 OE组裸鼠皮下移植瘤体积和重量均增大(P>0.05),瘤体内PKM2和CD163表达上调(P均>0.05),血清葡萄糖和乳酸水平显著升高(P均<0.05)。结论 PKM2表达变化影响TAMs细胞表型分化，而TAMs细胞中PKM2的表达可能通过无氧糖酵解作用，影响食管癌细胞的恶性表型。

关键词

食管癌 / 肿瘤相关巨噬细胞 / M2型丙酮酸激酶 / 恶性表型