基于转录组学探讨醋酸棉酚对子宫肌瘤潜在作用机制研究

摘要

目的 采用转录组测序(RNA-sequencing, RNA-seq)技术，探讨醋酸棉酚对子宫肌瘤潜在作用机制。方法 将子宫平滑肌瘤细胞分为对照组(Control组)、高剂量组(醋酸-棉酚80μmol/L),采用CCK-8检测细胞增殖活性；转录组测序，筛选靶点分子。进一步实验增加阳性药对照组(米非司酮，10μmol/L)、中剂量组(醋酸-棉酚40μmol/L)、低剂量组(醋酸-棉酚20μmol/L),实时荧光定量PCR验证CXC趋化因子配体3(CXCL3)和N-myc下游调节基因1(NDRG1)的mRNA表达情况。Western blot检测CXCL3和NDRG1的蛋白表达情况。结果 与对照组(100.00%±2.16%)相比，高剂量组的细胞增殖活性(48.13%±0.44%)显著降低(P<0.05)。两组共有3 410个明显差异表达基因(DEGs);与对照组相比，高剂量组中有1 546个基因明显上调，1 864个基因明显下调；富集分析揭示上调的DEGs主要富集在MAPK、TNF、HIF-1等信号通路，下调的DEGs主要富集于cAMP、细胞周期等信号通路；实时荧光定量PCR结果显示，与对照组比较，高、中、低剂量组中NDRG1和CXCL3的mRNA表达水平均降低(P<0.05);与阳性药对照组比较，高、中、低剂量组中NDRG1和CXCL3的mRNA表达水平升高(P<0.05);与高剂量组比较，中、低剂量组中NDRG1和CXCL3的mRNA表达水平升高(P<0.05);与中剂量组比较，低剂量组中NDRG1和CXCL3的mRNA表达水平升高(P<0.05)。Western blot检测结果显示，与对照组比较，高、中、低剂量组中NDRG1蛋白表达水平降低，高、中剂量组中CXCL3蛋白表达水平降低(P<0.05);与阳性药对照组比较，高、中、低剂量组中NDRG1蛋白表达水平升高，中剂量组和低剂量组中CXCL3蛋白表达水平升高(P<0.05);与高剂量组比较，中剂量组和低剂量组中CXCL3蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 醋酸棉酚通过降低CXCL3、NDRG1的表达，进而影响子宫肌瘤的发生发展。上调的差异表达基因主要富集在MAPK、TNF、HIF-1等信号通路，为醋酸棉酚可能通过影响这些信号通路在子宫肌瘤中发挥潜在治疗作用提供了初步线索。

关键词

子宫平滑肌瘤 / 转录组学 / 醋酸棉酚 / 作用机制

基金资助

新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2022D01C581); 国家自然科学基金项目(82360722)