大肠埃希菌ESBLs基因型与生物被膜调控基因pgaABCD对其耐药性的相关性分析

摘要

目的 探究产超广谱β-内酰胺酶（Extended spectrum beta-lactamases, ESBLs）基因与生物被膜调控基因pgaABCD表达之间的相关性以及二者对产ESBLs大肠埃希菌抗生素耐药性的影响。方法 收集2021年1-12月本院临床分离的大肠埃希菌，通过双纸片协同试验筛选出产ESBLs菌株66株，采用标准Kirby-Bauer圆盘扩散法进行药敏试验，通过实时荧光PCR鉴定ESBLs基因bla_CTX-M-1、bla_CTX-M-14、bla_TEM-1、bla_SHV-12和生物被膜调控基因pgaA、pgaB、pgaC、pgaD的分布情况，采用结晶紫染色法评价生物被膜形成能力，对比不同生物被膜形成能力组间生物被膜调控基因表达差异，对ESBLs基因检出率、pgaABCD基因检出率与生物被膜形成能力之间进行相关性分析。结果 66株产ESBLs大肠埃希菌的耐药模式以多重耐药为主：75.8%的分离株对3种及以上抗生素耐药，耐药率前三的抗生素是氨苄西林（100.0%）、头孢唑林（100.0%）和头孢曲松（97.0%）,其次是左氧氟沙星和环丙沙星（耐药率均为87.9%）;所有菌株均能够形成生物被膜，分别有40株（60.6%）、22株（33.3%）和4株（6.1%）菌株表现出强、中和弱水平生物被膜形成能力；检出最多的ESBLs基因型是bla_CTX-M-1（57.6%）,其次是bla_TEM-1（39.4%）,有30株菌株同时携带2种及以上ESBLs基因，所有受试菌均检出pgaA基因，60株菌检出pgaC基因，36株菌同时携带pgaA、pgaB、pgaC和pgaD 4种基因，其中pgaC基因的检出率分别与生物被膜形成能力（Phi=0.367,P=0.012）及bla_CTX-M-1基因检出率（Phi=0.368,P=0.003）呈显著正相关。生物被膜形成能力与抗生素耐药性之间虽未发现显著相关性（P>0.05）,但表现出生物被膜形成能力越强，菌株携带的ESBLs基因种类越多，耐药特征也愈加复杂的特点。结论 bla_CTX-M-1可能通过上调生物被膜调控基因pgaC的表达增强生物被膜形成能力，从而促进耐药基因传播。

关键词

大肠埃希菌 / 产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) / 生物被膜 / pga基因 / 耐药性