基于AKT/mTOR通路探究养阴活胃方对慢性萎缩性胃炎大鼠模型自噬的影响

摘要

目的 基于蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin, mTOR)通路探讨养阴活胃方对慢性萎缩性胃炎大鼠模型自噬的影响。方法 选取雄性SD大鼠50只为研究对象，10只作为空白组，其余40只采用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG)以及饥饱失常法造模，持续10周，建立CAG大鼠模型。造模成功后将模型大鼠随机分为模型组(1 mL/100 g生理盐水灌胃)、养胃舒组(养胃舒颗粒0.25 g/kg灌胃)、养阴活胃方组(22.62 g/kg养阴活胃方饮片量灌胃),空白组不进行干预，其余各组每天灌胃1次，持续8周。观察各组大鼠表征、检测胃液酸碱度(Power of hydrogen, pH),酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清白细胞介素-1β(Inter leukin-1 beta, IL-1β)、白细胞介素-6(Inter leukin-6,IL-6)含量；苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin, HE)染色观察胃组织病理变化；免疫组织化学法(Immuno histochemistry, IHC)检测胃黏膜AKT、mTOR蛋白阳性表达面积，蛋白免疫印迹法(Western blot, WB)检测胃黏膜AKT、mTOR、Beclin-1、LC3B蛋白表达量情况。结果 与空白组比较，模型组胃液pH值、IL-1β、IL-6、AKT、mTOR均升高(P<0.05);模型组大鼠体重、胃壁厚度、Beclin-1、LC3B明显降低(P<0.05),且HE染色显示胃黏膜出现明显萎缩、炎症、肠化。与模型组比较，养胃舒组及养阴活胃方组胃液pH值、IL-1β、IL-6、AKT、mTOR均降低(P<0.05),体重、胃壁厚度、Beclin-1、LC3B蛋白均升高(P<0.05),且HE染色显示胃黏膜萎缩、炎症减轻。与养胃舒组比较，养阴活胃方组IL-1β、AKT、mTOR、Beclin-1蛋白表达水平均降低(P<0.05),LC3B蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论 养阴活胃方能有效改善CAG模型大鼠胃黏膜的病理状况，抑制AKT/mTOR通路，激活或增强细胞自噬，达到治疗CAG的作用。

关键词

养阴活胃方 / 慢性萎缩性胃炎 / AKT/mTOR通路 / 自噬