SERPINA5对食管鳞癌细胞化疗敏感性的影响及分子机制研究

摘要

目的 研究SERPINA5异常表达对食管鳞癌细胞化疗敏感性的影响及分子机制。方法 采用Western blot检测SERPINA5食管黏膜上皮细胞系SHEE及食管鳞癌细胞系KYSE150、TE-1、ECA109的表达水平。选取KYSE150/TE-1细胞系转染过表达空载慢病毒（oe-NC）、过表达SERPINA5慢病毒（oe-SERPINA5）,采用CCK-8检测不同浓度（0、20、40、60、80μmol/L）顺铂（Cisplatin, CDDP）处理KYSE150/TE-1细胞24、48 h的半数抑制浓度(IC₅₀)。采用Edu和平板克隆实验检测过表达SERPINA5后KYSE150/TE-1细胞在顺铂作用下的增殖情况，流式细胞术实验检测细胞的凋亡比率。15只雌性裸鼠被随机分为oe-NC组、oe-NC+CDDP组和oe-SERPINA5+CDDP组，通过皮下接种转染oe-NC/oe-SERPINA5慢病毒的KYSE150细胞株构建裸鼠移植瘤模型，予以oe-NC组腹腔注射生理盐水，oe-NC+CDDP组和oe-SERPINA5+CDDP组腹腔注射等体积顺铂溶液（1次/3 d,共7次）,并测量各组裸鼠瘤体体积及质量，进一步通过Ki67、TUNEL染色检测移植瘤组织增殖及凋亡水平。Western blot检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达水平。结果 SERPINA5在食管鳞癌细胞中呈低表达。与oe-NC组比较，oe-SERPINA5组IC₅₀值明显降低（P<0.05）;与oe-NC+CDDP组比较，oe-SERPINA5+CDDP组细胞增殖水平降低、凋亡比例增加，差异有统计学意义（P<0.05）。动物实验结果表明，SERPINA5过表达显著抑制顺铂处理下的瘤体生长，降低肿瘤细胞增殖能力，并促进其凋亡，差异有统计学意义（P<0.05）。与oe-NC+CDDP组比较，oe-SERPINA5+CDDP组可抑制PI3K和AKT蛋白磷酸化，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 SERPINA5过表达可降低食管鳞癌细胞增殖能力和诱导细胞凋亡，提高食管鳞癌细胞的化疗敏感性，其机制与抑制PI3K/AKT信号通路相关。

关键词

食管鳞癌 / SERPINA5 / 化疗敏感性 / PI3K/AKT信号通路