缺氧诱导因子-1α调控内皮-间充质转化在缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺血管重塑中的作用研究

摘要

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)调控内皮-间充质转化(Endothelial to mesenchymal transition, EndoMT)在缺氧性肺动脉高压(Hypoxia induced pulmonary hypertension, HPH)新生大鼠肺血管重塑(Pulmonary vascular remodeling, PVR)中的作用机制。方法 96只Wistar新生大鼠随机分为常氧组、缺氧组、缺氧+YC-1(HIF-1α抑制剂)组和缺氧+HIF-1α组，每组再按不同观察时间点随机分为3、7、14 d亚组，每个亚组8只新生大鼠。常氧组给予空病毒尾静脉注射1 d后，每日给予生理盐水腹腔内注射；缺氧组给予空病毒尾静脉注射1 d后，每日生理盐水腹腔注射后开始8 h缺氧处理；缺氧+YC-1组给予空病毒尾静脉注射1 d后，每日YC-1(10 mg/kg)腹腔注射后开始8 h缺氧处理；缺氧+HIF-1α组尾静脉注射8×10～9PFU/mL的腺病毒(标有绿色荧光信号，携带HIF-1α的重组腺病毒载体)1 d后，每日生理盐水腹腔注射后开始8 h缺氧处理。在干预处理后3、7、14 d时，用直接测压法测量右心室收缩压(Right ventricular systolic pressure, RVSP);荧光显微镜观察腺病毒转染情况；苏木精-伊红染色观察肺血管形态，计算肺血管重塑指标肺小动脉中层血管壁厚度占血管外径的百分比(MT%)和肺小动脉中层截面积的百分比(MA%);间接免疫荧光双标法检测肺组织中内皮标志物CD31和α平滑肌肌动蛋白(α smooth muscle actin, αSMA)的表达水平；实时荧光定量聚合酶链反应检测CD31、αSMA和HIF-1α mRNA表达水平。结果 与常氧组相比，干预处理后3、7、14 d时，通过缺氧处理的各组RVSP均升高，MA%、MT%增加(P<0.05),CD31表达降低，而αSMA表达升高，HIF-1α mRNA表达升高(P<0.05);与缺氧组相比，干预后7 d、14 d时，缺氧+YC-1组RVSP降低，MA%、MT%减少，CD31表达升高，αSMA表达降低，HIF-1α mRNA表达降低(P<0.05);干预后7 d、14 d时，缺氧+HIF-1α组RVSP进一步升高，MA%、MT%增加，CD31表达降低，αSMA表达升高，HIF-1α mRNA表达升高(P<0.05)。结论 缺氧及HIF-1α的抑制及过表达影响了EndoMT的过程，HIF-1α可能通过调控EndoMT促进HPH新生大鼠的PVR。

关键词

缺氧性肺动脉高压 / 内皮-间充质转化 / 缺氧诱导因子-1α / 新生大鼠