HIF-1α调控TRPC6在新生大鼠HPH肺血管重塑中的作用机制研究

摘要

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)调控经典型瞬时受体电位通道6(TRPC6)在新生大鼠缺氧性肺动脉高压(HPH)肺血管重塑中的作用机制。方法 将32只Wistar新生大鼠随机分为常氧组、HPH组、过表达HIF-1α+HPH组(HIF-1α组)、HIF-1α抑制剂+HPH组(2ME组)。常氧组在常氧环境下饲养，其余3组建立HPH模型，其中HIF-1α组大鼠通过尾静脉注射携带HIF-1α基因的腺病毒载体，2ME组每日皮下注射2-甲氧基雌二醇(2ME),各组以干预处理后14 d作为实验终点。直接测压法测量右心室收缩压(RVSP);称重计算右心室肥厚指数(RVHI);苏木精-伊红染色观察肺远端小动脉形态，计算血管重塑指标(MT%、MA%)进行定量分析；免疫组化法检测肺组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达以评估肺血管平滑肌细胞增殖水平，同时检测HIF-1α、TRPC6蛋白在肺组织中的表达水平；实时荧光定量-聚合酶链反应法检测HIF-1α、TRPC6、PCNA的转录水平。结果 与常氧组比较，HPH组新生大鼠RVSP、RVHI、MT%、MA%升高(P<0.05),肺组织HIF-1α、TRPC6、PCNA的蛋白表达和mRNA水平升高(P<0.05);与HPH组比较，HIF-1α组新生大鼠RVSP、RVHI、MT%、MA%升高(P<0.05),肺组织HIF-1α、TRPC6、PCNA的蛋白表达和mRNA水平升高(P<0.05);与HPH组比较，2ME组RVSP、RVHI、MT%、MA%降低(P<0.05),肺组织HIF-1α、TRPC6、PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05),TRPC6、PCNA mRNA水平降低(P<0.05);与HIF-1α组比较，2ME组RVSP、RVHI、MT%、MA%降低(P<0.05),肺组织HIF-1α、TRPC6、PCNA蛋白表达和mRNA水平降低(P<0.05)。结论 慢性缺氧刺激下HIF-1α可能通过上调TRPC6,促进新生大鼠HPH肺血管重塑，该研究可能为新生儿HPH提供新的治疗靶点。

关键词

缺氧诱导因子-1α / 经典型瞬时受体电位通道6 / 缺氧性肺动脉高压 / 新生大鼠