寒湿痹阻证膝骨性关节炎大鼠模型造模技术探索及评价

摘要

目的 探讨寒湿痹阻证膝骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)大鼠模型制备方法。方法 选取24只雄性SD大鼠，随机分为假手术组、手术组、寒湿痹阻证组，每组8只。假手术组右膝皮肤切开后立即缝合；手术组行前交叉韧带切断术(Anterior cruciate ligment transection, ACLT)切断前交叉韧带；寒湿痹阻证组在ACLT的基础上，术后第14天开始使用人工气候箱，温度为10.5℃,湿度90%,每天坚持同一时间段放置4 h,连续4周。4周后取材，通过Micro-CT观察大鼠膝关节骨骼微结构改变，酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测各组大鼠血液中白细胞介素-1β(Interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α, TNF-α)含量。结果 与假手术组及手术组比较，寒湿痹阻证组出现毛发枯槁，出现畏寒、精神不振，反应敏感、畏惧等证型表现。与假手术组比较，手术组与寒湿痹阻证组大鼠膝周直径均增大，差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1周，与假手术组比较，寒湿痹阻证组机械刺激缩足反应阈值(Paw with drawl threshold, PWT)和热刺激缩足潜伏期(Paw with drawal latency, PWL)均明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。术后3周、4周，与假手术组比较，手术组和寒湿痹阻证组均明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。Micro-CT显示，与假手术组比较，手术组、寒湿痹阻证组软骨表面粗糙不平、关节间隙狭窄，关节表层结构破坏。与假手术组比较，手术组、寒湿痹阻证组IL-1β、IL-6、TNF-α含量均显著增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 本研究采用ACLT结合气候箱模拟寒湿痹阻证造模方法，兼顾中西医病因，模型评价全面，可为寒湿痹阻证KOA疾病的中医药现代化研究提供稳定模型。

关键词

膝骨性关节炎 / 寒湿痹阻证 / 大鼠模型

基金资助

国家自然科学基金项目(82360979); 新疆维吾尔自治区科技创新团队(天山创新团队)项目(2022TSYCTD0008)