LINC01354靶向miR-214-3p调控脑胶质瘤细胞增殖、凋亡及焦亡的功能及机制研究

摘要

目的 探究LINC01354调控脑胶质瘤细胞增殖、凋亡及焦亡的功能及机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人小胶质细胞HMC3和脑胶质瘤细胞U251中LINC01354相对表达量。双荧光素酶报告基因实验验证LINC01354和miR-214-3p的靶向关系。人脑胶质瘤细胞U251分为空白组、sh-NC组、sh-LINC01354组、miR-214-3p mimic组、miR-NC组、sh-LINC01354+miR-214-3p inhibitor组和sh-LINC01354+inhibitor NC组。MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。Western blot检测细胞焦亡相关蛋白NOD样受体家族吡喃结构域包含蛋白3(NLRP3)、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Cleaved Caspase-1)和剪切的N-末端消皮素D(Cleaved N-terminal GSDMD)蛋白表达。结果 人脑胶质瘤细胞U251中LINC01354表达高于人小胶质细胞HMC3(P<0.001),双荧光素酶报告基因结果显示miR-214-3p为LINC01354靶基因。MTT和流式细胞术检测结果显示，sh-LINC01354组U251细胞增殖能力低于sh-NC组(P<0.05),细胞凋亡高于sh-NC组(P<0.001),NLRP3、Cleaved Caspase-1和Cleaved N-terminal GSDMD蛋白表达均高于sh-NC组(P<0.01)。miR-214-3p mimic组U251细胞增殖能力均低于miR-NC组(P<0.05),细胞凋亡高于miR-NC组(P<0.001),NLRP3、Cleaved Caspase-1和Cleaved N-terminal GSDMD蛋白表达均高于miR-NC组(P<0.001)。sh-LINC01354+miR-214-3p inhibitor组U251细胞增殖高于sh-LINC01354+inhibitor NC组(P<0.05),细胞凋亡低于sh-LINC01354+inhibitor NC组(P<0.001)。结论 LINC01354靶向抑制miR-214-3p影响U251细胞的增殖、凋亡及焦亡。

关键词

LINC01354 / miR-214-3p / 脑胶质瘤 / 增殖 / 凋亡 / 焦亡