陈元膏摩法通过抑制脂质过氧化改善膝骨性关节炎的机制研究

摘要

目的 观察陈元膏摩法对丙二醛（Malondialdehyde, MDA）、二价铁离子(Ferrousion, Fe²⁺)、活性氧（Reactive oxygen species, ROS）以及白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）以及肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）表达的影响，探究陈元膏摩法治疗膝骨性关节炎的效果及作用机制。方法 24只新西兰大白兔随机抽取6只为空白组，其余18只采用前交叉韧带切断术（Anterior cruciate ligament transection model, ACLT）制备膝骨性关节炎（Knee osteoarthritis, KOA）模型，将成模KOA兔随机分为模型组、扶他林组、陈元膏摩法组，每组6只。空白组和模型组不予干预，陈元膏摩法组在涂抹陈元膏基础上推拿治疗，每日1次，连续治疗4周。扶他林组每只兔用扶他林软膏在相同部位1 g涂抹，推拿手法操作同陈元膏摩法组。干预前1 d、干预后28 d,通过奎森功能障碍指数（Lequesne functional severity index, Lequesne MG）评估膝关节。干预结束后次日取材，苏木精-伊红（Hematoxylin and eosin, HE）染色法观察软骨组织病理学变化；透射电镜观察线粒体形态；酶联免疫吸附（Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）试剂盒等检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Fe²⁺、ROS含量。结果 病理结果显示，空白组兔膝关节软骨表面光滑，软骨层及。软骨细胞形态良好，软骨下骨及骨小梁结构规则，滑膜组织未见明显增生，滑膜细胞线粒体的形态结构较正常。模型组兔膝关节软骨结构破坏，部分软骨层缺失伴纤维组织增生、软骨细胞退变、坏死、软骨下骨及骨小梁结构紊乱伴结构破坏，滑膜组织增生伴较多炎细胞浸润，滑膜细胞细胞核核周隙增宽；胞浆中线粒体明显肿胀，体积变大，嵴减少、断裂或消失，基质大量溶解呈絮状甚至空泡状。扶他林组和陈元膏摩法组膝关节软骨结构破坏程度及滑膜细胞线粒体形态结构较模型组均有所改善。干预前，与空白组相比，模型组、扶他林组和陈元膏摩法组兔膝关节Lequesne MG评分升高（P<0.05）;干预后，与空白组相比，模型组软骨组织病理损伤严重，膝关节Lequesne MG评分、曼金（Mankin osteoarthritis histological grading system, Mankin′s）评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α表达升高（P<0.05）。与模型组相比，陈元膏摩法组软骨组织病理损伤有所好转，膝关节Lequesne MG评分、Mankin′s评分、血清中IL-1β、 IL-6、 TNF-α含量以及滑膜组织中MDA、Fe²⁺、ROS表达降低（P<0.05）。结论 陈元膏摩法可能是通过抑制脂质过氧化，降低炎症因子的表达，进而改善KOA兔软骨损伤及炎症反应。

关键词

陈元膏 / 推拿疗法 / 膝骨性关节炎 / 脂质过氧化 / 炎症因子