机械敏感性离子通道Piezo1对TIE2-L914F突变的静脉畸形血管内皮细胞中血管生长相关因子表达的影响

摘要

目的 探讨机械敏感性离子通道Piezo1对血管内皮生长因子(VEGF)、血小板源性生长因子(PDGF)、转化生长因子-β(TGF-β)在静脉畸形(Venous malformations, VMs)细胞模型中促血管生成的作用。方法 通过慢病毒转染人脐静脉内皮细胞系(HUVEC),构建TIE2-L914F与TIE2-WT过表达的细胞模型，分别为L914F组和WT组，未转染的HUVEC细胞设为Control组。通过CCK-8实验检测YODA1(Piezo1的激动剂)和GsMTx4(Piezo1的抑制剂)药物对细胞毒性的影响。采用Western blot检测Piezo1、VEGF、PDGF和TGF-β蛋白的表达水平。结果 CCK-8结果显示，在0.1～6μmol/L YODA1浓度和0.5～3μmol/L GsMTx4浓度下，干预12 h各组细胞增殖作用能够持续，细胞存活率均在80%以上，最终确定后续实验YODA1干预浓度为6μmol/L,GsMTx4干预浓度为3μmol/L。Western blot结果显示，在WT组与L914F组中，Piezo1蛋白表达低于Control组(P<0.05),GsMTx4(3μmol/L)干预12 h后，PDGF、VEGF和TGF-β蛋白表达水平均较未干预组降低(P<0.05),YODA1(6μmol/L)干预12 h后，VEGF、PDGF和TGF-β蛋白表达水平均较未干预组升高(P<0.05)。结论 VMs细胞模型中Piezo1表达低于Control组，提示Piezo1参与VMs的发生，通过YODA1与GsMTx4的干预，提示Piezo1参与调控血管生长因子VEGF、PDGF和TGF-β的表达，从而促进VMs疾病的发展。

关键词

静脉畸形 / Piezo1 / 机械敏感性离子通道 / YODA1 / GsMTx4

基金资助

新疆维吾尔自治区自然科学基金青年科学基金项目(2022D01C252); 新疆维吾尔自治区研究生创新项目(XJ2024G94)