补肾痹通方通过β-catenin/SOX9轴调控炎症-氧化应激网络促进膝骨关节炎软骨修复的机制研究

摘要

目的 探讨补肾痹通方(BSBT)通过调节β-连环蛋白(β-catenin)/SRY盒转录因子9(SOX9)信号轴改善膝骨关节炎(KOA)软骨损伤的分子机制。方法 将50只SD大鼠平均分为CON、M-KOA、M-F-LC、M-F-MC及M-F-HC组，除CON组以外，其余4组采用改良Hulth法构建KOA大鼠模型，造模成功后，M-KOA组(予以2 mL/100 g生理盐水灌胃)、M-F-LC组(予以BSBT 8.17 g/kg灌胃)、M-F-MC组(予以BSBT 16.34 g/kg灌胃)、 M-F-HC组(予以BSBT 32.68 g/kg灌胃),除CON组外其余各组每天灌胃1次，持续3周。苏木精-伊红(HE)和番红固绿染色观察软骨组织形态变化；蛋白质免疫印迹(WB)和实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测软骨组织中SOX9、β-catenin、II型胶原蛋白α1链(COL2A1)、Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达；ELISA检测血清炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅱ型胶原羧基端交联肽(CTX-II)水平；生化检测血清氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果 与M-KOA组相比，M-F-MC组和M-F-HC组显著改善软骨病理损伤，降低β-catenin和RUNX2表达(P<0.05),上调SOX9和COL2A1表达(P<0.05);同时TNF-α、IL-1β、IL-6、CTX-II水平均降低，TGF-β1水平升高，并降低MDA含量，增强SOD和GSH活性(P<0.05)。结论 补肾痹通方促进软骨修复，可能通过调控β-catenin/SOX9信号通路，抑制炎症反应与氧化应激。本研究为中医药治疗KOA的分子机制提供了实验依据。

关键词

膝骨关节炎 / 补肾痹通方 / β-catenin/SOX9信号通路 / 炎症反应 / 氧化应激 / 软骨修复