硫醚环化B螺旋肽(CHBP)通过抑制炎症反应改善内毒素诱导的小鼠急性肾损伤

摘要

目的 探讨硫醚环化B螺旋肽(Thioether-cyclized helix B peptide, CHBP)对内毒素诱导的小鼠急性肾损伤(Lipopolysaccharide induced acute kidney injury, LPS-AKI)的保护作用及其相关机制。方法 取45只小鼠，随机分为5组，分别为Control组(n=5)、生存率-LPS组(n=15)、生存率-LPS+CHBP组(n=15)、LPS组(n=5)、LPS+CHBP组(n=5)。生存率-LPS组小鼠腹腔注射15 mg/kg LPS;生存率-LPS+CHBP组小鼠注射15 mg/kg LPS的同时腹腔注射8 nmol/kg CHBP,此后每24 h腹腔注射8 nmol/kg CHBP 1次，生存率-LPS组小鼠腹腔注射相同体积的PBS,连续7 d,观察两组小鼠生存情况。LPS组和LPS+CHBP组小鼠均腹腔注射10 mg/kg LPS建立LPS-AKI模型，Control组小鼠不做造模处理。LPS组不做额外处理；LPS+CHBP组在腹腔注射LPS的同时腹腔注射8 nmol/kg CHBP;Control组给予等量的PBS缓冲液。在造模后24 h,对Control组、LPS组及LPS+CHBP组小鼠进行样本采集。苏木精-伊红染色法观察各组小鼠肾脏组织形态并进行肾脏组织学评分；酶联免疫吸附实验测定各组小鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的水平；实时荧光定量聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)测定肾组织中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)和肾损伤因子1(Kidney injury molecule-1,KIM-1)mRNA的表达水平。结果 生存率-LPS组小鼠7 d生存率为33.33%,生存率-LPS+CHBP组小鼠7 d生存率为73.33%,CHBP治疗提高LPS-AKI小鼠生存率。与Control组相比，LPS组小鼠肾小球明显萎缩，肾脏损伤评分、血清Scr水平、血清BUN水平、血清炎症指标TNF-α、IL-6、IL-1β水平及急性损伤标志物NGAL、KIM-1 mRNA表达量均升高(P<0.05);与LPS组相比，LPS+CHBP组小鼠肾小球萎缩明显改善，肾脏损伤评分、血清Scr水平、血清BUN水平、血清炎症指标TNF-α、IL-6、IL-1β水平及急性损伤标志物NGAL、KIM-1 mRNA表达量均下降(P<0.05)。结论 CHBP治疗显著提高LPS-AKI小鼠的生存率，并通过减轻炎症反应等多种途径对LPS-AKI小鼠起到保护性作用。

关键词

脓毒症 / 急性肾损伤 / 硫醚环化B螺旋肽 / 炎症因子