LncRNA MIAT调控食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

摘要

目的 明确长链非编码RNA心肌梗死相关转录本(Long chain non-coding RNA myocardial infarction associated transcript, lncRNA MIAT)在食管鳞癌(Esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)中的表达和临床意义以及对ESCC细胞生物学行为的影响。方法 通过癌症基因组图谱(The cancer genome atlas, TCGA)数据库分析lncRNA MIAT在食管癌中的表达，60例ESCC患者的组织标本采用实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测lncRNA MIAT的表达水平，并分析其与患者病理特征的关系。进一步将MIAT干扰慢病毒(LV-MIAT-RNAi)和阴性对照病毒(sh-NC)转染至TE-1和ECA109细胞，分为实验组(shMIAT组)和空载组(vector组),未做任何处理的TE-1和ECA109细胞作为空白对照组(control组)。通过细胞功能学实验分析lncRNA MIAT对ESCC细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移和侵袭的影响；利用Western blot检测沉默lncRNA MIAT对TE-1和ECA109细胞上皮间充质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)中蛋白表达情况。最后通过裸鼠皮下成瘤实验分析不同分组中荷瘤裸鼠瘤体的重量及体积变化情况。结果 TCGA数据库中数据显示，lncRNA MIAT在食管癌组织中的表达升高，在ESCC癌组织中lncRNA MIAT的表达量(0.26±0.63)较癌旁组织(0.08±0.27)升高(t=3.097,P=0.008)。lncRNA MIAT的表达水平与肿瘤大小、分化程度和淋巴结转移相关(P均<0.05)。在TE-1与ECA109细胞中，shMIAT组相较于control组和vector组，表现出细胞增殖率降低、凋亡率升高、迁移与侵袭细胞数目减少；同时，E-cadherin蛋白表达水平上升而N-cadherin表达水平下降(P均<0.05)。沉默lncRNA MIAT可提高G0/G1期的比例，降低G2/M期的比例。荷瘤裸鼠体内实验表明，与control组及vector组相比，shMIAT组裸鼠的皮下肿瘤体积更小、重量更轻(P<0.05)。结论 lncRNA MIAT在ESCC组织中高表达，沉默lncRNA MIAT可抑制ESCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力，减轻裸鼠瘤体的重量，减小体积，lncRNA MIAT在ESCC中发挥促癌作用。

关键词

食管鳞癌 / lncRNA MIAT / 细胞增殖 / 细胞迁移