弥漫大B细胞淋巴瘤中p52、RelB和IRF4/MUM1蛋白表达水平的临床价值及调控作用研究

摘要

目的 研究弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL)中p5、RelB及干扰素调节因子4/多发性骨髓瘤致癌基因1(Interferon regulatory factor 4/multiple myeloma oncogene 1, IRF4/MUM1)蛋白表达水平与患者临床病理参数及生存情况的相关性，探究p52、RelB与IRF4/MUM1蛋白间的调控作用。方法 收集2012年2月至2017年12月在新疆医科大学第一附属医院诊断的175例DLBCL病例，采用免疫组化法检测DLBCL组织中p52、RelB及IRF4/MUM1蛋白的表达水平；分析p52、RelB及IRF4/MUM1蛋白表达水平与DLBCL患者临床病理参数的相关性；采用Spearman法分析DLBCL中p52、RelB及IRF4/MUM1蛋白表达水平间的相关性；采用Kaplan-Meier法分析DLBCL中p52、RelB及IRF4/MUM1蛋白表达水平与患者生存的相关性。在DLBCL SU-DHL-4(Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4)、OCI-LY3(Ontario Cancer Institute-Lymphoma-3)细胞系中沉默IRF4/MUM1基因或抑制p52、RelB蛋白表达，采用Western blot法检测IRF4/MUM1、p52、RelB、磷酸化p52(p-p52)、磷酸化RelB(p-RelB)蛋白的表达水平，分析抑制p52、RelB蛋白表达后对IRF4/MUM1、p-p52、p-RelB蛋白表达的影响，沉默IRF4/MUM1基因对p52、RelB、p-p52、p-RelB蛋白的影响。采用CCK8实验及流式细胞术进一步分析抑制p52、RelB蛋白表达或沉默IRF4/MUM1基因对DLBCL细胞系的增殖、凋亡的影响。结果 DLBCL组织中p52、RelB和IRF4/MUM1蛋白阳性率分别为61.7%(108/175)、64.0%(112/175)和55.4%(97/175),p52、RelB和IRF4/MUM1蛋白高表达率分别为41.7%(73/175)、30.9%(54/175)和36.0%(63/175);在IRF4/MUM1蛋白高表达的病例中存在p52和RelB蛋白高表达率较高(P均<0.05,r=0.524、0.659)。p52蛋白在DLBCL患者临床分期I～II期、有发热等B组症状(B症状)、有结外侵犯、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)>250 IU/L、体能状态(Performance Status, PS)评分2～5分、活化B细胞(Activated B-cell-like, ABC)分型时高表达率较高(P均<0.05);RelB蛋白在有结外侵犯、ABC分型时高表达率较高(P均<0.05);IRF4/MUM1蛋白在DLBCL患者临床Ⅰ～Ⅱ期、有B症状、有结外侵犯、LDH>250 IU/L、PS评分2～5分、ABC分型、有骨髓累及时高表达率较高(P均<0.05)。生存分析显示p52、RelB蛋白高表达的DLBCL患者总生存率(Overall survival, OS)、无病生存率(disease free survival, PFS)均下降(P均<0.05);IRF4/MUM1蛋白高表患者显示更低的无病展生存率(P<0.05)。在SU-DHL-4和OCI-LY3两种DLBCL细胞系中，沉默IRF4/MUM1基因后p-p52、p-RelB蛋白表达水平均降低，细胞系增殖水平降低，凋亡率增加；抑制p52、RelB蛋白表达后IRF4/MUM1蛋白表达水平也降低，细胞系增殖水平降低，凋亡率增加(P均<0.05)。结论 DLBCL患者肿瘤组织中p52、RelB蛋白和IRF4/MUM1蛋白表达水平呈正相关，IRF4/MUM1蛋白高表达与p52、RelB有协同作用，是DLBCL患者预后不良的独立危险因素。

关键词

弥漫大B细胞淋巴瘤 / p52 / RelB / 干扰素调节因子4/多发性骨髓瘤致癌基因1 / 协同 / 预后