表皮生长因子受体(EGFR)调控尿激酶型纤溶酶原激活物(PLAU)促进食管癌浸润转移的机制研究

摘要

目的 探讨表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor, EGFR)调控尿激酶型纤溶酶原激活物(Urokinase-type plasminogen activator, PLAU)在食管癌中的功能机制。方法 取食管癌和食管癌癌旁组织芯片，在组织水平上，采用酪酰胺信号放大技术检测食管癌及癌旁组织的EGFR的表达水平，分析食管癌组织EGFR的表达与临床病理参数的相关性，应用Kaplan-Meier生存曲线分析EGFR表达与食管癌患者预后的相关性。在细胞水平上转染shEGFR质粒，敲减EGFR基因表达，分为Control组、shEGFR-1和shEGFR-2组，分别应用噻唑蓝(MTT)、细胞划痕、Transwell试验分析其对食管癌细胞增殖、转移和侵袭能力的影响。4D非标记定量蛋白质组学法检测表皮生长因子(EGF)组和Control组细胞，筛选差异表达蛋白。采用免疫组织化学法检测食管癌和食管癌癌旁组织中PLAU蛋白的表达，分析食管癌组织中PLAU的表达与临床病理参数的相关性。应用STRING平台构建差异蛋白互作网络，分析EGFR与PLAU的互作关系。采用蛋白免疫印迹法检测shEGFR-1组细胞PLAU的表达。结果 在组织水平上，EGFR在食管癌组织中高表达，其表达水平与食管癌的N分期相关，且EGFR表达量越高，其预后越差；在细胞水平上，转染shEGFR敲减EGFR基因后，食管癌KYSE150细胞的增殖明显受到抑制；与Control组相比，shEGFR-1(37.27±3.12)和shEGFR-2组(38.43±6.32)划痕愈合率降低；shEGFR-1组(351.00±3.00)和shEGFR-2组(548.00±4.00)侵袭到下室的细胞数量减少(P<0.001);蛋白组学结果显示，EGF明显上调PLAU蛋白的表达，蛋白互作网络提示EGF与PLAU存在直接互作关系。在细胞水平上敲减EGFR后，PLAU蛋白表达下降。PLAU在食管癌组织中高表达，并与肿瘤直径和病理分级呈正相关。结论 EGFR基因在食管癌中扮演癌基因角色，并且与PLAU具有正向协同作用，EGFR可能通过调控PLAU促进食管癌的进展。

关键词

食管癌 / 表皮生长因子受体 / 尿激酶型纤溶酶原激活物 / 侵袭转移

基金资助

国家自然科学基金项目(82560478); 省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室开放课题项目(SKL-HIDCA-2024-SG14)