基于铁死亡-炎症crosstalk探讨芪红胶囊治疗冠状动脉微循环疾病的机制研究

摘要

目的 运用网络药理学及分子生物学实验分析芪红胶囊改善冠状动脉微循环疾病（Coronary microvascular disease, CMVD）的机制。方法 利用网络药理学方法获取芪红胶囊活性成分及靶点、CMVD靶点及铁死亡相关基因，运用EVENN、STRING及Cytoscape等软件筛选核心靶点，进行KEGG和GO富集分析；采用CB-Dock 2计算分子对接结合能。通过生化检测、HE染色、免疫组化、普鲁士蓝染色、Western Blotting实验，RT-qPCR等检测大鼠血清密度脂蛋白胆固醇（High-density lipoprotein cholesterol, HDL-C）,降低大鼠血清低密度脂蛋白胆固醇（Low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C）、总胆固醇（Total cholesterol, TC）、甘油三酯（Triglyceride, TG）及血清Fe²⁺水平、心肌组织病理改变、微血管密度、铁沉积及主动脉组织中铁死亡相关蛋白的表达。结果 网络药理学分析获得芪红胶囊通过铁死亡通路改善CMVD核心成分10个、核心靶点6个；GO富集于氧化还原酶活性、凋亡信号通路调节等，KEGG富集于铁死亡、p53、MAPK等通路；分子对接显示，除油酸外多数成分与核心靶点结合能<-5 kJ/mol。动物实验表明芪红胶囊可升高大鼠血清HDL-C,降低大鼠血清LDL-C、TC、TG及血清Fe²⁺水平；改善心肌病理结构，减少铁沉积；上调大鼠主动脉中谷胱甘肽过氧化物酶4（Glutathione peroxidase 4,GPX4）、溶质载体家族7成员11（Solute carrier family 7 member 11,SLC7A11）、铁蛋白轻链（Ferritin light chain, FTL）、铁蛋白重链1（Ferritin heavy chain 1,FTH1）蛋白及GPX4基因表达，下调大鼠主动脉中长链脂酰辅酶A合成酶4（Acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4）蛋白表达。结论 芪红胶囊通过其活性成分作用于花生四烯酸代谢、TP53信号通路以及MAPK通路介导的氧化应激信号转导来调节CMVD大鼠的铁死亡通路，起到改善CMVD的效果。

关键词

芪红胶囊 / 铁死亡 / 冠状动脉微循环疾病 / 网络药理学 / 分子对接

基金资助

新疆维吾尔自治区卫生健康委员会“天山英才”医药卫生高层次人才培养计划项目(TSYC202301B169)