刺猬皮乙醇提取物通过调节TGF-β/Smad信号通路减轻阿霉素肾病大鼠的肾损伤

摘要

目的 研究刺猬皮乙醇提取物(EEA)对阿霉素肾病(ADRN)大鼠的肾脏保护作用机制。方法 采用单剂量尾静脉注射阿霉素诱导ADRN大鼠模型，将建模成功的32只大鼠随机分为模型组(生理盐水，2 mL/100 g)、强的松组(强的松，10 mg/kg)、高剂量EEA组(EEA,900 mg/kg)和低剂量EEA组(EEA,450 mg/kg),另取8只大鼠作为空白组，每天给药1次，给药4周。称定脾脏、左肾质量，计算脾脏指数和左肾指数。每7 d收集1次大鼠24 h尿液测定尿蛋白含量。采用ELISA测定各组大鼠血清中血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、活性氧(ROS)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量；采用HE、Masson染色观察各组大鼠左肾组织病理学形态；免疫组织化学法检测左肾中Podocin、Fibronectin的阳性表达；Real-time PCR和Western blot法检测大鼠右肾中TGF-β/Smad信号通路相关蛋白TGF-β1、Smad3、Smad7的表达。结果 与空白组相比，模型组脾脏指数、左肾指数、24 h尿蛋白(第1、2、3、4周相同时间点比较时)、TNF-α、IL-1β、Scr、BUN、ROS含量、Fibronectin阳性率、TGF-β1、Smad3 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);Podocin阳性率、Smad7 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);肾小球、肾小管增大，肾间质炎性细胞浸润，出现肾组织病理损伤；与模型组相比，强的松组、高、低剂量EEA组脾脏指数、左肾指数、24 h尿蛋白(第2、3、4周相同时间点比较时)、Scr、BUN、ROS含量、Fibronectin阳性率、TGF-β1、Smad3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),Podocin阳性率、Smad7 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),肾小球、肾小管大小有不同程度的减小，肾间质炎性细胞浸润有不同程度减轻，肾组织病理损伤改善，强的松组、高剂量EEA组IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.01)。结论 EEA可保护ADRN大鼠肾功能，减轻肾组织损伤，并延缓肾纤维化，其机制可能与抑制TGF-β/Smad信号通路有关。

关键词

刺猬皮乙醇提取物 / 阿霉素肾病大鼠 / TGF-β/Smad信号通路 / 肾损伤 / 保护机制

基金资助

广西壮族自治区中医药管理局自筹经费科研项目(GXZYA20240513)