两型棘球绦虫丝氨酸蛋白酶活性差异及其对肝脏巨噬细胞募集的影响

摘要

目的 探讨细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus sensu lato,E.granulosus s.l.）和多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis,E.multilocularis）微囊及其丝氨酸蛋白酶（Serine protease, SP）对巨噬细胞募集的影响，为阐明棘球蚴病免疫病理机制提供理论依据。方法 建立C57BL/6J小鼠肝门静脉感染模型，分为假手术对照组、E.granulosus s.l.感染组和E.multilocularis感染组。感染12周后取肝脏组织行HE染色，采用免疫组织化学法检测CD19⁺B细胞、CD3⁺T细胞和CD68⁺巨噬细胞的表达。测定两型棘球绦虫微囊及其分泌物中的SP酶活性，利用xCELLigence检测微囊及重组SP蛋白对巨噬细胞的趋化作用。结果 E.multilocularis感染组肝脏呈侵袭性生长，大量炎性细胞浸润、坏死及纤维化。E.granulosus s.l.感染组形成局限性囊肿，炎性带较薄。两型棘球蚴感染组病灶周围CD19⁺B细胞、CD3⁺T细胞和CD68⁺巨噬细胞表达均高于假手术对照组（P<0.05）,但两型感染组间差异无统计学意义。B细胞在病灶外围呈簇状增生。两型棘球绦虫微囊及分泌物均具SP酶活性，E.granulosus s.l.低剂量时活性较高，E.multilocularis活性呈剂量依赖性升高。两型棘球绦虫微囊均可显著诱导巨噬细胞迁移（P<0.01）,且E.multilocularis微囊的趋化作用强于E.granulosus s.l.微囊（P<0.01）,而重组SP蛋白对巨噬细胞无直接趋化作用（P>0.05）。结论 两型棘球蚴感染均可募集肝脏炎症细胞，E.multilocularis病理损伤更重，可能与其SP活性持续升高有关。棘球绦虫SP可能通过间接机制参与炎症细胞募集，本研究为理解棘球蚴病免疫病理机制提供了新线索。

关键词

棘球蚴病 / 细粒棘球绦虫 / 多房棘球绦虫 / 丝氨酸蛋白酶

基金资助

新疆维吾尔自治区重点研发计划项目(2024B03021-1); 新疆维吾尔自治区“天山英才”培养计划-科技创新团队项目(2023TSYCTD0017)