巨噬细胞移动抑制因子调控肺泡上皮细胞凋亡在脂多糖诱导小鼠急性肺损伤中的机制研究

摘要

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)缺失对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡上皮细胞凋亡通路的调控作用。方法 将雄性C57BL/6J野生型(WT)和MIF基因敲除(MIFKO)小鼠随机分为WT对照组、WT+LPS组、MIFKO对照组及MIFKO+LPS组，每组6只。模型组气管滴注LPS(5 mg/kg)建立ALI模型，对照组滴注同等体积生理盐水，12 h后处死。通过肺重/胫骨长度(LW/TL)比值评估肺水肿；HE染色观察肺组织病理损伤情况；TUNEL染色检测细胞凋亡；Western blot检测Cleaved Caspase-3、Bax及Bcl-2表达。在体外实验中，将小鼠肺泡上皮细胞(MLE-12)分为空载体(Vec)组、MIF过表达(MIF-OE)组、Vec+LPS(10μg/mL)组和MIF-OE+LPS(10μg/mL)组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot检测上述凋亡蛋白表达。结果 动物实验中，与WT+LPS组相比，MIFKO+LPS组小鼠肺湿重/胫骨长比值显著降低(P<0.01),肺组织病理损伤情况减轻，TUNEL阳性细胞数明显减少(P<0.01)。Western blot显示，MIFKO+LPS组Cleaved Caspase-3和Bax表达均下调(P均<0.05),Bcl-2表达升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值升高(P<0.01)。细胞实验中，与Vec+LPS组相比，MIF-OE+LPS组MLE-12细胞总凋亡率显著升高(P<0.01),Western blot显示，Cleaved Caspase-3、Bax上调和Bcl-2下调(P均<0.05)。结论 MIF通过激活Bcl-2/Bax/Caspase-3凋亡通路促进小鼠肺泡上皮细胞的凋亡，从而加重LPS诱导的ALI,提示MIF或可成为ALI的潜在治疗靶点。

关键词

急性肺损伤 / 巨噬细胞移动抑制因子 / 细胞凋亡 / 脂多糖

基金资助

国家自然科学基金地区项目(82560162); 新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目(2024D01D24); 新疆维吾尔自治区重点研发计划项目(2024B03036-2)