重组猪凝血因子Ⅷ的功能鉴定及潜在治疗作用的研究

摘要

目的 评估重组猪凝血因子Ⅷ（recombinant porcine factorⅧ，rp FⅧ）对血友病A型（hemophilia A,HA）伴抑制物患者的潜在治疗作用。方法 通过凝血酶酶切、rp FⅧ与血管性血友病因子（von Willebrand factor,VWF）的亲和力、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）及血栓弹力图等方法对rp FⅧ进行了体外活性分析。并对rp FVIII在动物体内外的药效及药代动力学特征进行了评估。结果 rp FⅧ可被凝血酶激活。在APTT检测中，相比阴性对照组（105.2 s）,rp FⅧ组的凝血时间显著缩短（43.3 s,P<0.05）。在动物实验中，相比模型对照组（43.1 s）,rp FⅧ给药组小鼠的血浆在APTT检测中的凝血时间显著缩短（28.8 s,P<0.05）；且rp FⅧ与市售药Xyntha （重组人FⅧ）在小鼠体内的血药代谢趋势相似，两者间的各项药代动力学参数相近。在含有FⅧ抑制物的体外药效评价模型中，当以猴血浆（含有抗人FⅧ抗体）作为研究对象时，在各实验条件下，相比Xyntha组，rp FⅧ组的凝血时间均显著缩短（P<0.05）；在血栓弹力图实验中，相比阴性对照组与Xyntha组，rp FⅧ组的凝血时间明显缩短（P<0.05）；当以HA患者血浆（含有抗人FⅧ抗体）作为研究对象时，相比阴性对照组（患者1血浆：99.2 s，患者2血浆：97.7 s）,rp FⅧ组的凝血时间显著缩短（患者1血浆：55.8 s，患者2血浆：43.6 s,P<0.05）。结论 rp FⅧ具备良好的生物学活性，在动物及体外实验中均展示出了对伴抑制物HA患者的潜在治疗作用。

关键词

血友病A / 猪重组凝血因子Ⅷ / FⅧ抑制物 / 活化部分凝血活酶时间(APTT)