Rnd3调节VEGFA-VEGFR2信号通路对下肢缺血小鼠血管新生的影响

摘要

目的 Rho家族GTP酶3(Rnd3)在血管内皮功能调控中发挥关键作用，本研究拟探讨Rnd3对下肢缺血小鼠血管新生的影响及可能的作用机制。方法 随机将野生型（WT）小鼠分为假手术组（Sham组）和下肢缺血组（HLI组）。使用Rnd3内皮细胞特异性过表达（Rnd3ECTG）小鼠及其同窝野生型（WT）小鼠建立下肢缺血模型。将HUVECs分别给予Ad-Rnd3过表达病毒及其对照病毒Ad-Vector干预。采用激光散斑血流灌注成像仪检测小鼠下肢血流、免疫荧光染色检测血管新生水平、EdU增殖染色检测HUVECs增殖能力、成管实验检测HUVECs血管形成能力、Westernblot检测腓肠肌组织和HUVECs中Rnd3与VEGFA通路关键靶标及受体的蛋白表达和磷酸化水平。结果 与WT假手术组相比，下肢缺血模型小鼠腓肠肌组织中Rnd3和VEGFA表达显著增加（P<0.01）；与WT下肢缺血组相比，内皮特异性过表达Rnd3显著改善缺血下肢血流灌注、增加毛细血管密度（P<0.01）。Rnd3过表达促进内皮细胞的增殖和血管形成，增加内皮细胞VEGFR2和ERK1/2的磷酸化水平（P<0.01）。结论 Rnd3促进缺血后下肢血管新生，改善血流灌注，其具体机制与其介导VEGFA表达增加以及促进VEGFR2磷酸化，促进内皮细胞增殖和血管形成相关。

关键词

Rnd3 / 外周动脉疾病 / 内皮细胞 / 血管新生 / VEGFA-VEGFR2信号通路