支链氨基酸氨基转移酶1通过P53信号调节过氧化氢导致的肾小管上皮细胞损伤

摘要

目的 探讨支链氨基酸氨基转移酶1（branched chain amino acid aminotransferase-1,BCAT1）调控肾小管上皮细胞（tubular epithelial cell,TEC）损伤的作用和机制。方法从C57BL/6J小鼠肾组织中分离并培养TEC。通过腺病毒转染TEC分别实现BCAT1过表达和敲低；通过过氧化氢（hydrogen dioxide,H₂O₂）处理诱导TEC凋亡；通过CCK-8评估TEC细胞活力；通过检测Cleaved-caspase3表达水平和原位末端转移酶标记（TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL）染色评估TEC凋亡；使用P53抑制剂PFT-1α阻断P53信号评估其在BCAT1调节TEC损伤中的作用。结果在H₂O₂处理的TEC中，BCAT1 mRNA和蛋白水平均显著降低（均P<0.01）。沉默BCAT1后，H₂O₂诱导的TEC凋亡显著加重（均P<0.01）；而过表达BCAT1显著减轻了H₂O₂诱导的TEC凋亡（均P<0.01）。沉默BCAT1导致H₂O₂处理的TEC中P53下游基因表达水平进一步升高，提示沉默BCAT1进一步激活了P53信号（均P<0.05）。P53抑制剂PFT-1α可以明显消除由沉默BCAT1导致的P53信号活化和TEC凋亡（均P<0.01）。结论BCAT1通过P53信号调控H₂O₂诱导的TEC损伤，可能是一个防治慢性肾脏病有潜力的治疗靶点。

关键词

BCAT1 / 肾小管上皮细胞 / P53 / 细胞凋亡