内皮微粒包裹的miR-204-3p介导川崎病血管炎性损伤的机制探讨

摘要

目的 探讨内皮微粒（EMP）包裹的miR-204-3p介导川崎病（KD）血管炎性损伤的作用机制。方法 2016年4月至2021年3月，58例KD患者和50例对照组入选本研究。其中，18例KD患者伴有冠状动脉瘤（CAA），其余为无冠状动脉瘤（NCAA）。分离各组血清样品中EMP，并进行全基因组miRNA测序。在体外试验中，将VSMC或预转染miR-204-3p模拟物(AgomiR-204-3p)、miR-204-3p抑制剂（AntagomiR-204-3p）的VSMC与各组EMP共培养。结果 通过全基因组miRNA测序以及RT-qPCR分析证实miR-204-3p在KD EMP中显著增加，并且EMP中miR-204-3p水平根据冠状动脉病理严重程度显著降低，顺序为NCAA>SCAA>MCAA>GCAA。与对照组EMP共培养相比，VSMC与NCAA EMP共培养48 h后增殖率显著降低（P<0.05）,VSMC分化标志物（ACTA2和CNN1）表达显著增加（P<0.05），去分化标志物（OPN和PDGFRβ）表达显著降低（P<0.05）。双荧光素酶报告基因检测证实，EMP中miR-204-3p在功能上靶向VSMC中的PDGFRβ。在与NCAA EMP孵育的VSMC中，使用AntagomiR-204-3p可显著降低分化标记物（ACTA2和CNN1）的表达，并增加去分化标记物（OPN和PDGFRβ）的表达。在与CAA EMP孵育的VSMC中，给予AgomiR-204-3p显著增加分化标记物的表达，并降低去分化标记物的表达。结论 EMP将miR-204-3p转移到VSMC并通过靶向PDGFRβ部分介导KD血管炎性损伤。因此，靶向miR-204-3p-PDGFRβ轴可能为KD诱导的血管病变提供新的治疗选择。

关键词

内皮微粒 / miR-204-3p / 川崎病 / 血管炎性损伤 / 血管平滑肌细胞

基金资助

陕西省重点研发计划项目（2021KW-64）