LncRNA H19调控miR-22促进冠脉旁路移植术后血管新生的信号传导机制

摘要

目的 构建冠脉旁路移植术后大鼠模型，评估LncRNA H19通过miR-22促进缺血心肌组织血管新生的信号传导机制。方法 选择SD大鼠20只，随机分为2组：观察组，予以结扎冠脉前降支行自体右颈外静脉—颈总动脉移植术建立冠脉搭桥术模型；对照组，予以假手术处理。于术后第2周处死大鼠，取大鼠心脏，培养心肌微血管内皮细胞（CMEC）。qRT-PCR检测并比较2组CMEC中LncRNA H19和miR-22的表达水平；构建shRNA H19干扰LncRNA H19的表达。通过脂质体Lipfectamine 2000介导将miR-22 mimics及其NC、inhibitor-miR-22及其NC转染至CMEC细胞，应用Transwell法检测CMEC细胞的迁移能力；应用MTT增殖试验检测CMEC细胞增殖活性；应用Matrigel matrix方法测定内皮细胞成管能力。结果 与对照组比较，观察组LncRNA H19与miR-22呈高表达（P<0.05），且LncRNA H19表达水平与miR-22表达水平呈正相关（r=0.772,P<0.05）。shRNA H19能有效干扰观察组CMEC细胞的miR-22表达（P<0.05）。miR-22-mimics组CMEC细胞迁移能力最高，miR-22-inhibitor组最低（P<0.05），而miR-22 NC组、miR-22-mimicsNC组与miR-22-inhibitor NC组无差异。MTT细胞增殖试验显示，5组CMEC细胞OD值存在显著差异，miR-22-mimics组CMEC细胞最高，miR-22-inhibitor组最低（P<0.05），而其他3组无差异。miR-22-mimics组CMEC细胞成管能力最高，miR-22-inhibitor组最低（P<0.05），而其他3组无差异。结论 LncRNA H19能通过上调miR-22表达水平形成信号传导通路，从而促进冠脉旁路移植术后大鼠新生血管生成。

关键词

冠状动脉搭桥术 / 血管新生 / 长链非编码RNA / miRNA-22 / 信号传导