司美格鲁肽抑制经典及非经典途径细胞焦亡减轻缺氧/复氧AC16人心肌细胞炎症损伤

摘要

目的 探究司美格鲁肽对缺氧/复氧AC16人心肌细胞经典及非经典途径细胞焦亡的影响。方法 取对数生长期的AC16细胞,随机分为3组：对照组、缺氧/复氧模型组、缺氧/复氧加司美格鲁肽组。除对照组外，其余2组细胞均进行缺氧8 h、复氧12 h处理。CCK-8试剂盒检测细胞活性。ELISA试剂盒检测白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-18。乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）试剂盒检测细胞损伤情况。Western blot法检测细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（cysteine aspartate protease,Caspase）-1、Caspase-4、焦孔素D(Gasdermin-D,GSDMD)、核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)蛋白表达。免疫荧光染色法观察各组细胞GSDMD阳性表达。透射电子显微镜观察各组AC16细胞细胞膜破损情况。结果 与对照组相比，缺氧/复氧组IL-1β、IL-18及LDH明显升高(P<0.01)，焦亡相关蛋白Caspase-1、Caspase-4、GSDMD及NLRP3表达均明显增加(P<0.01)，且免疫荧光染色法观察细胞GSDMD的荧光强度显著增加(P<0.01)。与缺氧/复氧组相比，缺氧复氧加司美格鲁肽组IL-1β、IL-18及LDH均明显降低(P<0.01)，焦亡相关蛋白Caspase-1、Caspase-4、GSDMD及NLRP3表达均显著降低(P<0.01)，且免疫荧光染色法观察细胞GSDMD的荧光强度明显降低(P<0.01)。结论 司美格鲁肽可能通过抑制Caspase-1和Caspase-4，抑制焦亡的经典途径和非经典途径，从而抑制心肌细胞焦亡，减少炎症因子释放，减轻缺氧/复氧导致的心肌炎症损伤，保护心肌细胞。

关键词

司美格鲁肽 / 缺氧复氧 / 心肌细胞 / 炎症 / 焦亡 / 经典途径 / 非经典途径