磷酸弗林酸性簇分选蛋白2(PACS-2)在高血压诱导心脏功能障碍中的作用

摘要

目的 探讨磷酸弗林酸性簇分选蛋白2（PACS-2）在高血压诱导心脏功能障碍中的作用。方法 将H9c2细胞分为对照（Con）组、精氨酸加压素（AVP）组、AVP+载体（Vector）组和AVP+PACS-2组。进行罗丹明鬼笔环肽染色评估相对细胞表面积，和测量活性氧（ROS）生成。蛋白质印迹分析细胞中PACS-2和MAPK通路表达。使用5,5',6,6'-四氯-1,1',3,3'-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物（JC-1）测量线粒体膜电位。将20只野生型（WT）小鼠随机分为2组，每组10只：WT组和WT+精氨酸加压素（AVP）组；将20只PACS-2基因敲除（PACS-2-/-）小鼠随机分为2组，每组10只：PACS-2-^/-组和PACS-2-^/-+AVP组。WT+AVP组和PACS-2-/-+AVP组通过皮下注射AVP诱导小鼠心脏肥大。通过超声心动图获得小鼠心动图参数。结果 与Con组相比，AVP组和AVP+Vector组H9c2心肌细胞的相对细胞表面积、DCFH-DA荧光水平和线粒体mitoSOX荧光水平显著增加（P<0.05），和线粒体膜电位显著降低（P<0.05）；与AVP+Vector组相比，AVP+PACS-2组的相对细胞表面积、 DCFH-DA荧光水平和mitoSOX荧光水平显著降低（P<0.05），和线粒体膜电位显著增加（P<0.05）。RNA测序分析显示，MAPK信号传导途径参与了PACS-2的心肌保护作用。与AVP+Vector组相比，AVP+PACS-2组p-P38、p-ERK、p-JNK表达显著降低（P<0.05）。与WT组相比，AVP+WT组和PACS-2-/-+AVP组射血分数（EF%）、短轴缩短率（FS%）和心输出量（CO）显著降低（P<0.05），左心室内径舒张末期（LVIDd）、左心室舒张期和收缩期后壁厚度（LVPWd和LVPWs）增加（P<0.05），并且PACS-2-/-+AVP组上述指标变化程度较AVP+WT组更大（P<0.05）。结论 PACS-2对AVP损伤的心肌细胞具有保护作用，其作用机制涉及MAPK信号通路。

关键词

磷酸弗林酸性簇分选蛋白2 / 心脏功能障碍 / 精氨酸加压素 / 线粒体相关膜