蒙药沙棘五味散调控PI3K/AKT/mTOR通路介导的自噬改善作用对低氧性肺动脉高压大鼠心肺保护作用及机制

摘要

目的探究蒙药沙棘五味散调节磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/AKT/mTOR）通路介导的自噬改善作用对低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠心肺损伤的影响。方法 50只大鼠随机分为对照组、模型组、沙棘五味散组、LY294002组、联合药物组，每组各10只。采用低压低氧法制备大鼠HPH模型。沙棘五味散和LY294002治疗4周后，进行心脏超声、右心室收缩压（RVSP）和右心室肥厚指数（RVHI）水平及肺功能检测；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆脑钠肽（BNP）、内皮素-1(ET-1)、NO、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平及肺泡灌洗液（BALF）白细胞介素（IL-6）、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；苏木精-伊红（HE）染色观察心/肺组织病理损伤；马松染色观察肺组织纤维化情况；免疫荧光染色检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达；蛋白免疫印迹检测肺组织PI3K、AKT、mTOR、p62、Beclin-1、微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组大鼠右心室内径（RVID）、右心室前壁厚度（RVAW）、RVSP、RVHI水平升高，潮气量（VT）、每分钟通气量（MV）、最大呼气流速（PEF）、50%潮气量时呼气流速（EF50）水平降低，血浆BNP、ET-1、iNOS水平升高，NO水平降低，BALF中IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高，心/肺损伤和纤维化明显，肺组织α-SMA、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、p62蛋白表达升高，Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达降低（均P<0.01）；与模型组相比，沙棘五味散组、LY294002组、联合药物组大鼠RVID、RVAW、RVSP、RVHI水平降低，VT、MV、PEF、EF50水平升高，血浆BNP、ET-1、iNOS水平降低，NO水平升高，BALF中IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低，心/肺损伤及纤维化减轻，肺组织α-SMA、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、p62蛋白表达降低，Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高（均P<0.01）；且联合药物组上述效果更明显（P<0.05,P<0.01）。结论 蒙药沙棘五味散通过调节PI3K/AKT/mTOR通路介导的自噬改善作用，改善HPH大鼠心肺损伤。

关键词

低氧性肺动脉高压 / 蒙药沙棘五味散 / PI3K/AKT/mTOR通路 / 自噬 / 心肺损伤