HuR调控NLRP3介导的细胞焦亡在ARDS内皮损伤中的作用及机制

摘要

目的 探讨RNA结合蛋白Hu抗原R(HuR)调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)介导的细胞焦亡在急性呼吸窘迫综合征（ARDS）内皮损伤中的作用及机制。方法 将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术（Sham）组、ARDS组、Lv-sh-NC组、Lv-sh-HuR组。除Sham组外，其他组小鼠腹膜内给药脂多糖（LPS）建立ARDS模型。人支气管上皮转化细胞系16HBE分为空白对照组（Con）、LPS组、sh-NC组、shHuR组。除Con组外，其他组暴露于LPS 24 h模拟体外ARDS模型。采用原位细胞凋亡检测试剂盒测量肺组织、16HBE细胞凋亡。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测支气管肺泡灌洗液（BALF）和细胞上清液中IL-1β和IL-18的水平。使用蛋白质印迹测定HuR、气皮蛋白D(GSDMD)、NLRP3的蛋白水平。结果 与Sham组相比，ARDS组小鼠肺组织中HuR水平、损伤评分、肺组织的湿/干重量比以及BALF中IL-1β、IL-18水平显著增加（P<0.01），而Lv-sh-HuR组小鼠肺组织中相关指标显著低于ARDS组（P<0.01）。与ARDS组相比，Lv-sh-HuR组小鼠肺组织中细胞凋亡率和肺组织中NLRP3、GSDMD蛋白水平显著降低（P<0.01）。与Con组相比，LPS组16HBE细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-18水平、TUNEL阳性细胞百分比和NLRP3、GSDMD蛋白水平显著增加（P<0.01），而sh-HuR组相关指标较LPS组显著降低（P<0.01）。结论 在LPS诱导小鼠ARDS和16HBE细胞焦亡中HuR水平升高，其可能通过调控NLRP3介导的细胞焦亡参与肺损伤的病理机制。

关键词

Hu抗原R / 细胞焦亡 / 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 / 急性呼吸窘迫综合征