黄腐酚通过Notch信号通路对甲状腺癌细胞B-CPAP增殖及凋亡的影响

摘要

目的：探讨黄腐酚通过Notch信号通路对甲状腺癌B-CPAP细胞增殖及凋亡影响。方法：体外培养甲状腺癌B-CPAP细胞，以不同浓度黄腐酚干预培养。根据黄腐酚浓度不同分为对照组（0μmol/L）、低剂量组（10μmol/L）、中剂量组（20μmol/L）、高剂量组（40μmol/L）。采用MTT法检测黄腐酚对B-CPAP细胞的增殖抑制率。采用Hoechst 33258染色方法，应用荧光显微镜观察不同组别B-CPAP细胞形态的变化。采用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测B-CPAP细胞凋亡率。采用Western-blot法测定Notch信号通路相关蛋白变化。结果：MTT检测结果表明，低剂量组、中剂量组及高剂量组分别处理24、48、72 h后，细胞增殖抑制率差异均有统计学意义（P<0.05）；同剂量组处理24、48、72 h后，细胞增殖抑制率逐渐增高，差异有统计学意义（F=204.51、169.64、183.15,P<0.05）。与对照组比较，高剂量组荧光显微镜下显示出典型细胞凋亡的形态学改变。流式细胞术检测B-CPAP细胞经不同剂量黄腐酚处理72 h后，凋亡率比较差异有统计学意义（F=1235.54,P<0.05），高剂量组凋亡率更高。Western-blot法结果显示，处理72 h，与对照组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组Notch1、Hes1、Bcl-2蛋白表达明显降低，而Cleaved caspase-3表达明显增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：黄腐酚可能通过Notch信号通路抑制B-CPAP细胞增殖及诱导凋亡。

关键词

甲状腺肿瘤 / 黄腐酚 / Notch信号通路

基金资助

2020年济南市卫健委第二批科技计划（2020-3-54