基于甲状腺外泌体探讨清肝散结消瘿方对桥本甲状腺炎免疫炎症的调控作用

摘要

目的:探讨清肝散结消瘿方通过调控甲状腺细胞外泌体对桥本甲状腺炎（HT）免疫炎症的干预作用,为其免疫调节机制提供实验依据。方法:采用清肝散结消瘿方含药血清干预Nthy-ori-3-1甲状腺细胞,以正常培养细胞为对照,提取两组甲状腺细胞来源外泌体,应用纳米颗粒跟踪分析、透射电子显微镜观察及Western blot检测外泌体的浓度、粒径、形态及特征性标志蛋白表达。建立人T淋巴细胞（H9）炎症模型,分别与正常外泌体（EXO-C组）及清肝散结消瘿方干预外泌体（EXO-T组）共孵育,通过Western blot和ELISA检测H9细胞炎症因子IL-17、IL-6水平。结果:外泌体鉴定结果显示,对照组和中药组Nthy-ori-3-1细胞外泌体颗粒浓度均处于1×10_～1×10¹¹/mL;粒径80～300 nm,呈典型球形或茶托状结构;TSG101、CD63、HSP70蛋白表达阳性。与炎症模型组及EXO-C组相比,EXO-T组可显著降低H9细胞内IL-17A蛋白的表达（P<0.05）,并抑制细胞上清中IL-17与IL-6水平（P<0.01）。结论:清肝散结消瘿方可能通过改善甲状腺细胞外泌体的功能状态,调节炎症微环境,抑制桥本甲状腺炎相关淋巴细胞炎症因子表达,进而发挥抗炎与甲状腺保护作用。

关键词

桥本甲状腺炎 / 清肝散结消瘿方 / 外泌体 / 淋巴细胞 / 免疫炎症