瑞马唑仑调节SPHK1/S1P/S1PR3信号通路对肝癌细胞增殖和迁移及侵袭的影响

摘要

目的：探究瑞马唑仑（REM）调节鞘氨醇激酶1/鞘氨醇-1-磷酸/鞘氨醇-1-磷酸酯受体3(SPHK1/S1P/S1PR3)信号通路对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法：分别用浓度为0、20、40、80、160、320μmol/L的REM处理人肝癌细胞系HepG2，检测细胞存活率，筛选药物浓度；基于细胞存活率结果，将对数期的细胞分为5组：对照组（Control组），瑞马唑仑低、中、高浓度组（REM-L、REM-M、REM-H组，对应20、40和80μmol/L）和瑞马唑仑高浓度+SPHK1激活剂组（REM-H+K6PC-5组）。MTT法检测HepG2细胞存活率；平板克隆实验检测细胞增殖能力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell小室法检测细胞侵袭能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况，Western blot检测细胞中SPHK1、S1P、S1PR3、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果：与Control组比，REM-L、REM-M、REM-H组HepG2细胞克隆数、划痕愈合率、侵袭数及Bcl-2、SPHK1、S1P、S1PR3、N-cadherin蛋白水平随着REM浓度的升高而逐渐降低，而细胞凋亡率和Bax、E-cadherin蛋白水平则呈现相反趋势（P<0.05）；与REM-H组比，REM-H+K6PC-5组HepG2细胞克隆数、划痕愈合率、侵袭数及Bcl-2、N-cadherin、SPHK1、S1P、S1PR3、N-cadherin蛋白水平显著升高，而细胞凋亡率和Bax、E-cadherin蛋白水平则明显下降（P<0.05）。结论：REM可能通过下调SPHK1/S1P/S1PR3信号通路遏制肝癌细胞的生长、转移和侵袭能力，同时诱导细胞凋亡。

关键词

瑞马唑仑 / 鞘氨醇激酶1/鞘氨醇-1-磷酸/鞘氨醇-1-磷酸酯受体3信号通路 / 肝癌细胞 / 增殖 / 迁移 / 侵袭