CHMP4C调控坏死性凋亡促进胃癌的作用及机制研究

摘要

目的：探讨染色质修饰蛋白4C(CHMP4C)调控坏死性凋亡途径在胃癌（GC）发生发展中的作用及机制。方法：通过生物信息学方法分析CHMP4C在泛癌中的表达情况，用RT-qPCR和Western blot检测人正常胃上皮细胞与GC细胞系中CHMP4C的表达情况。在GC细胞系中过表达或敲低CHMP4C，利用CCK-8、平板克隆形成实验检测CHMP4C对GC细胞生长、增殖能力的影响。利用CCK-8实验和Hoechst/PI双染色实验检测经坏死性凋亡诱导剂TSZ或抑制剂necrostatin-1(Nec-1)处理后，GC细胞死亡率和PI阳性细胞比率变化。Western blot检测GC细胞RIPK1、RIPK3、MLKL蛋白质及磷酸化水平。结果：CHMP4C在GC组织和细胞中表达升高。CCK-8和平板克隆形成实验结果显示，过表达CHMP4C的GC细胞增殖能力和集落形成效率明显提高，而敲低CHMP4C的GC细胞明显减弱。并且，CCK-8和Hoechst 33342/PI双染实验结果显示，上调CHMP4C能够抑制TSZ诱导的GC细胞死亡；而Nec-1能够逆转CHMP4C敲低引起的GC细胞活力减低。Western blot结果显示，p-RIPK1、p-RIPK3、p-MLKL水平在过表达细胞中均明显降低，而在敲低细胞中升高；对敲低细胞采用Nec-1处理后，这三种蛋白表达水平下降。结论：CHMP4C可能通过抑制RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路的磷酸化负向调控坏死性凋亡促进GC进展，有望成为GC治疗的潜在靶点。

关键词

胃肿瘤 / 染色质修饰蛋白4C / 坏死性凋亡 / 靶点

基金资助

国家自然科学基金项目（82172339）