褪黑素受体1A/B敲除对小鼠心房老化进程的影响

摘要

目的 探讨褪黑素受体1A (MT1)和褪黑素受体1B (MT2)敲除对老化相关心房颤动（AF）的影响。方法 将雄性C57BL/6J小鼠分为6组：8周对照组：野生型，6只，8周龄，体重21～23 g;8周MT1组：MT1敲除，6只，8周龄，体重21～23 g; 8周MT2组：MT2敲除，6只，8周龄，体重21～23 g; 12个月对照组：野生型，6只，12月龄，体重24～28 g; 12个月MT1组：MT1敲除，6只，12月龄，体重24～28 g; 12个月MT2组：MT2敲除，6只，12月龄，体重24～28 g。通过超声检测6组小鼠的左心房（LA）内径，电刺激评估小鼠AF诱导率及时间。通过HE染色、Masson染色、DHE染色、TUNEL凋亡染色、免疫荧光染色以及免疫组化染色评估小鼠心房炎症、纤维化、氧化应激和细胞凋亡水平。结果 超声心动图显示，与8周MT1组比较，12个月MT1组小鼠的LA内径明显增大；与12个月对照组比较，12个月MT1组小鼠的LA内径增大，差异均有统计学意义（P<0.05）。电刺激结果显示，与8周MT1组比较，12个月MT1组小鼠的AF诱导率与持续时间明显提高，差异有统计学意义（P<0.05）。炎症指标：iNOS免疫组织化学染色结果显示，与8周各组比较，12个月对照组、MT1及MT2组小鼠心房iNOS的表达均增加；与12个月对照组比较，12个月MT1、 MT2组小鼠心房iNOS的表达增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。纤维化水平指标：Masson染色显示，与8周各组比较，12个月对照组、 MT1及MT2组小鼠心房纤维化水平均增加；与12个月对照组比较，12个月MT1、MT2组小鼠的心房纤维化水平增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。免疫荧光染色结果显示，与8周各组比较，12个月对照组、MT1及MT2组小鼠心房Ⅲ型胶原蛋白（CollagenⅢ）的表达水平均增加；与12个月对照组比较，12个月MT1、MT2组小鼠心房CollagenⅢ的表达水平增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。α-SMA免疫组织化学染色结果显示，与8周各组比较，12个月对照组、 MT1及MT2组小鼠心房α-SMA的表达均增加；与12个月对照组比较，12个月MT1、MT2组小鼠心房α-SMA的表达增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。氧化应激指标：DHE染色结果显示，与8周各组比较，12个月对照组、MT1及MT2组小鼠心房氧化应激水平均增加；与12个月对照组比较，12个月MT1、MT2组小鼠心房氧化应激水平增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。γ-H2AX免疫荧光染色结果显示，与8周MT1、MT2组比较，12个月MT1、MT2组小鼠心房中γ-H2AX的表达水平明显增加；与12个月对照组比较，12个月MT1、 MT2组小鼠心房中γ-H2AX的表达水平明显增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。凋亡指标：TUNEL结果显示，与8周各组比较，12个月对照组、MT1及MT2组小鼠心房肌细胞凋亡细胞数均增加；与12个月对照组比较，12个月MT1、MT2组小鼠的心房肌细胞凋亡细胞数均增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。p16免疫组织化学结果显示，与8周各组比较，12个月对照组、MT1及MT2组小鼠心房p16表达量均增加；与12个月对照组比较，12个月MT1组小鼠心房p16表达水平增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 MT1和MT2，尤其是MT1，是影响小鼠心房老化进程的主要因素之一，其干预治疗可能延缓AF的发生和发展。

关键词

房颤 / 褪黑激素受体1A / 褪黑激素受体1B

基金资助

国家自然科学基金项目（82070380）; 辽宁省自然科学基金项目（2024-MS-160）