松茸多糖对MPP⁺诱发的PC12细胞损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的 探讨松茸多糖（TMP）对帕金森病（PD）体外细胞模型的保护作用机制。方法 将PC12细胞分为对照（Control）组、MPP⁺组、50 ng/mL TMP组、100 ng/mL TMP组和250 ng/mL TMP组。Control组不做任何处理；MPP⁺组加入800μmol/L MPP⁺，孵育24 h;50 ng/mL、100 ng/mL、250 ng/mL TMP组分别加入相应浓度的TMP孵育24 h后，再加入800μmol/L MPP⁺，孵育24 h。采用CCK-8法评估各组细胞活性，荧光探针（H2DCFDA）测定各组细胞ROS表达水平，线粒体红色探针（Mito Tracker Red）/Hoechst 33342荧光双染检测各组细胞线粒体活性，比色法检测各组细胞内ATP含量，Annexin Ⅴ-FITC/7-AAD双染检测各组细胞凋亡率，Western Blot法检测各组细胞凋亡蛋白表达水平。结果 与Control组相比，MPP⁺组中细胞活性降低，ROS水平升高，线粒体活性下降，ATP含量降低，细胞凋亡率升高且Bcl2/Bax相对蛋白表达量比值及Cleaved-Caspase 3相对蛋白表达量升高，差异均有统计学意义（P<0.001）。与MPP⁺组相比，50 ng/mL、100 ng/mL、250 ng/mL TMP组细胞活性升高，ROS表达量降低，ATP含量升高，细胞凋亡率降低，Cleaved-Caspase 3相对表达量降低，差异均有统计学意义（P<0.05）;100 ng/mL、250 ng/mL TMP组细胞线粒体质量升高，Bcl2/Bax相对蛋白表达量比值升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 TMP能够通过改善氧化应激和线粒体功能，阻止MPP⁺引发的PD体外细胞模型损伤。

关键词

松茸多糖 / 帕金森病 / PD体外细胞模型 / 线粒体功能障碍 / 氧化应激