基于光学表面波技术探究具核梭杆菌介导的自噬与细胞折射率的关系

摘要

目的 拟利用光学表面波传感技术，探索具核梭杆菌(fusobacterium nucleatum,Fn)介导的自噬水平与细胞折射率变化的关系，初步探究光学表面波技术对癌细胞自噬水平检测的潜力。方法 运用CCK-8技术检测Fn对结直肠癌细胞增殖活力的影响，蛋白免疫印迹法及自噬双标荧光法检测Fn对自噬水平的影响，同时采用光学表面波技术检测不同Fn感染状态下细胞折射率的变化，观察其与自噬水平的相关性。结果 当感染复数为100,感染时间为4 h时，自噬起始蛋白苄氯素1(Beclin-1)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(microtubule-associated protein 1A/1B light chain 3,LC3)蛋白表达水平升高(均P<0.05),螯合体1(sequestome, P62/SQSTM1)蛋白表达水平降低(P<0.01),自噬水平升高；同时光学检测结果显示，HCT116、HT29细胞的折射率亦随自噬水平的增高而升高(均P<0.01)。进一步研究表明，细胞折射率的变化主要在于细胞内自噬小体水平的变化，且不受细胞增殖及胞外物质等因素影响。结论 Fn介导的自噬水平与细胞折射率具有相关性，可实时反映Fn介导的自噬水平的变化，表明光学表面波技术可作为一种快速、直观且不影响细胞活性的检测自噬水平的技术。

关键词

具核梭杆菌 / 结直肠癌 / 自噬 / 光学表面波技术 / 细胞折射率

基金资助

天津市自然科学基金(21JCYBJC00120); 国家自然科学基金(12174203)