CD300c-Ig对小鼠关节损伤的影响及机制

摘要

目的 探讨CD300c-Ig对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritish, CIA)小鼠关节损伤的影响及作用机制。方法 分别在第1天及第21天免疫DBA/1J小鼠，构建CIA模型，随机分为处理组和对照组，每组10只。处理组腹腔注射20μg CD300c-Ig 100μL,1次/3 d,共6次，总剂量为120μg;对照组则腹腔注射相同质量的对照Ig蛋白(control-Ig),1次/3 d,共6次。观察四肢关节肿胀程度，记录关节炎指数评分；DBA/1J小鼠初次免疫40 d后，取小鼠脾脏制成单细胞悬液，流式细胞术检测调节性T细胞(T regulatory cells, Treg)、辅助性T细胞(T helper cells, Th17)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)的表达；取小鼠下肢，脱钙，制成切片进行苏木精-伊红染色及番红O染色，观察小鼠关节病理特征并进行评分。采用荧光定量PCR法检测叉头框蛋白P3(forkhead box protein P3, Foxp3)、白介素-17(interleukin-17, IL-17)和白介素-23(interleukin-23, IL-23)的mRNA表达。结果 处理组关节肿胀程度较对照组减轻，关节炎指数与对照组相比明显降低；苏木精-伊红染色及番红O染色显示，处理组关节滑膜细胞增殖较对照组减轻、血管翳形成、骨质侵蚀情况均比对照组有明显改善(P<0.05);流式细胞术检测结果显示，处理组脾脏Th17细胞比例较对照组明显降低(P<0.05),Treg细胞比例较对照组明显升高(P<0.05);同时，处理组脾脏TNF-α、IFN-γ表达与对照组相比明显降低(P<0.05);荧光定量PCR结果显示，处理组IL-17和IL-23 mRNA表达水平明显低于对照组。结论 CD300c-Ig可减轻CIA小鼠的关节损伤，其机制与其对Th17/Treg细胞平衡的调控和抑制炎性因子的释放有关。

关键词

CD300c / 细胞免疫 / 调节性T细胞 / 辅助性T细胞17 / 胶原诱导性关节炎