长链非编码RNA HEATR3反义RNA 1参与结直肠癌发生发展的功能及其临床意义

摘要

目的 探讨长链非编码RNA HEATR3反义RNA 1(lncRNA HEATR3 Antisense RNA 1, HEATR3-AS1)在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)中的表达特征、亚细胞定位模式、分子功能、临床病理意义及预后评估价值。方法 采用实时荧光定量PCR法检测结直肠癌组织中HEATR3-AS1的表达水平，荧光原位杂交技术明确其亚细胞定位，并分析HEATR3-AS1表达与HEATR3 mRNA表达水平的相关性。通过分子克隆技术构建HEATR3-AS1的真核表达载体，并构建其过表达细胞模型，从而明确其对HEATR3 mRNA表达的影响。采用原位杂交技术检测其在结直肠癌患者肿瘤组织中的表达，并探讨其表达与结直肠癌患者临床病理特征及不良生存预后的关联性。结果 HEATR3-AS1在结直肠癌组织中的表达量较正常组织显著上调(P=0.019 2),且定位于结直肠癌细胞的细胞核。其表达水平与HEATR3 mRNA表达水平呈显著正相关(P=0.020 2),且其过表达促进HEATR3 mRNA的表达(P=0.007 7)。其高表达与TNM分期(P=0.029)及淋巴结转移(P=0.036)存在显著统计学关联。生存分析表明，相较于HEATR3-AS1低表达的结直肠癌患者群体，其高表达结直肠癌患者的总生存期(overall survival, OS)显著缩短(P=0.001 1)。多因素Cox分析显示，HEATR3-AS1高表达可作为结直肠癌患者独立的不良预后因素(HR=3.355,95%CI:1.632～7.193,P=0.001 3)。结论 HEATR3-AS1在结直肠癌中表达上调且特异性定位于细胞核，其过表达可能参与HEATR3的转录调控过程，其异常高表达可作为评估结直肠癌患者预后的独立危险因素，有望成为结直肠癌分子分型和生存预测的新分子靶标。

关键词

结直肠癌 / 长链非编码RNA HEATR3-AS1 / 原位杂交 / 荧光原位杂交 / 预后