GPX1基因在肺癌中的表达特征及其对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响

摘要

目的 探讨谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase-1, GPX1)在不同病理类型肺癌细胞系中的表达特征、亚细胞定位以及对肺腺癌细胞生物学功能的影响。方法 分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹检测正常肺上皮细胞HPAEpic、肺腺癌细胞系A549和H292、肺鳞癌细胞系Calu1、大细胞肺癌细胞系95D、小细胞肺癌细胞系H446中GPX1在mRNA和蛋白水平的表达情况，通过方差分析对比不同病理类型肺癌细胞系与正常肺上皮细胞之间的GPX1表达差异；通过免疫荧光染色明确GPX1在肺腺癌细胞中的亚细胞定位；构建肺腺癌细胞系H292和A549 GPX1基因稳定敲低细胞株，于mRNA和蛋白水平验证敲低效率。分别采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell侵袭实验和流式细胞术检测H292和A549细胞株增殖、迁移、侵袭能力和细胞凋亡。结果 实时荧光定量PCR结果显示，与正常肺上皮细胞HPAEpic相比，GPX1基因在肺腺癌细胞系H292中的表达上调(P=0.006)。蛋白质免疫印迹结果显示，与正常肺上皮细胞HPAEpic相比，GPX1在多种肺癌细胞系(A549、H292、Calu1、95D、H446)中表达均上调(P<0.001)。CCK-8实验、划痕实验、Transwell侵袭实验、流式细胞术结果显示，敲低GPX1基因表达后，H292和A549细胞增殖(P<0.001)、迁移(P<0.001,P=0.002)、侵袭能力均减弱(P=0.039,P=0.014),细胞凋亡增加(P=0.008,P=0.040)。结论 GPX1基因在多种病理类型肺癌细胞系中高表达，且在肺腺癌细胞系中表达水平最高，GPX1主要定位于细胞质。敲低GPX1基因表达可显著抑制A549和H292肺腺癌细胞株的增殖、迁移及侵袭能力，并促进细胞凋亡。

关键词

肺腺癌 / 谷胱甘肽过氧化物酶1 / 增殖 / 迁移 / 侵袭 / 凋亡

基金资助

国家科技重大专项课题(2024ZD0529503)