低温等离子体诱导黑色素瘤细胞免疫原性细胞死亡的研究

王香妮; 刘进仁; 崔怡馨; 鹿佳佳; 何芷柔; 许玉琳; 李荣荣; 石兴民; 吴喜利

西安交通大学学报（医学版） ›› 2025, Vol. 46 ›› Issue (1) : 20 -27.

王香妮, 刘进仁, 崔怡馨, 鹿佳佳, 何芷柔, 许玉琳, 李荣荣, 石兴民, 吴喜利

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摘要

目的比较低温等离子体(low-temperature plasma, LTP)直接处理和等离子体活化液(plasma-activated medium, PAM)处理对黑色素瘤细胞免疫原性细胞死亡(immunogenic cell death, ICD)的诱导作用。方法 LTP直接处理和PAM处理黑色素瘤细胞B16F10细胞24 h后，通过MTT检测细胞活力，使用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞表面钙网蛋白(calreticulin, CRT)的表达情况，用三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)检测试剂盒检测培养液中ATP含量，使用ELISA法检测细胞培养液中高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1, HMGB1)含量；用LTP处理的B16F10与未成熟的树突状细胞(dendritic cells, DC)DC2.4细胞系共培养，流式细胞术检测DC表面分子(CD80和CD86)。结果与对照组相比，两种处理方式均能导致B16F10细胞活力下降，细胞凋亡率增加，细胞内活性氧(ROS)增多，CRT表达升高、ATP和HMGB1分泌含量增加(P<0.05)。在相同处理时间下，LTP直接处理的B16F10细胞CRT表达和ATP释放高于PAM处理(P<0.05)。与DC2.4组相比，DC细胞成熟标志分子CD80在LTP-120s组、LTP-180s组、PAM-120s组、PAM-180s组表达比例升高，DC细胞成熟标志分子CD86在LTP-120s组、LTP-180s组、PAM-180s组的表达比例升高，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 LTP直接处理和PAM处理均可诱导黑色素瘤细胞发生ICD,LTP直接处理诱导效果更佳。