鳖甲煎丸通过CMTM6抑制Hep3B细胞的恶性生物学行为

摘要

目的 探讨鳖甲煎丸(Biejiajian Pill, BJJP)对肝癌Hep3B细胞恶性生物学行为的作用及调控机制。方法 将72只健康SD大鼠随机分为空白对照(BC)组、低剂量(0.55 g/kg)、中剂量(1.10 g/kg)、高剂量(2.20 g/kg)BJJP实验组，制备含药血清。将Hep3B细胞分为BC组、正常大鼠血清处理(NC)组、低剂量BJJP(LBJJP)组、中剂量BJJP(MBJJP)组、高剂量BJJP(HBJJP)组；空载质粒(pcDNA3.1)组和趋化素样因子超家族成员6(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing 6,CMTM6)过表达(pcDNA3.1-CMTM6)组；以及NC+pcDNA3.1组、MBJJP+pcDNA3.1组、NC+pcDNA3.1-CMTM6组和MBJJP+pcDNA3.1-CMTM6组。CCK-8检测肝癌Hep3B细胞的增殖；Transwell实验检测肝癌Hep3B细胞的迁移和侵袭；Western blotting实验检测肝癌Hep3B细胞中增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)以及CMTM6蛋白的表达。结果 与BC组相比，NC组Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭能力以及PCNA、EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)、CMTM6蛋白的表达均无统计学差异(P>0.05)。与NC组相比，LBJJP、MBJJP和HBJJP含药血清均能抑制Hep3B细胞的增殖、迁移和侵袭数量，下调PCNA的蛋白表达，MBJJP和HBJJP均能上调E-cadherin的蛋白表达，下调N-cadherin、Vimentin和CMTM6的蛋白表达，差异均具有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA3.1组相比，pcDNA3.1-CMTM6组Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭受到抑制，E-cadherin的蛋白表达显著下调，而PCNA、N-cadherin和Vimentin蛋白表达显著上调，差异均具有统计学意义(P<0.05)。与NC+pcDNA3.1组相比，MBJJP+pcDNA3.1组Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭能力降低，PCNA、Vimentin和N-cadherin蛋白表达降低，而E-cadherin蛋白表达升高；与NC+pcDNA3.1-CMTM6组相比，MBJJP+pcDNA3.1-CMTM6组Hep3B细胞的增殖、迁移和侵袭能力及PCNA、Vimentin、N-cadherin和E-cadherin蛋白表达得到了与上述相同的结果，差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 BJJP可能通过调控CMTM6的表达抑制肝癌细胞Hep3B的增殖、迁移、侵袭及EMT等恶性生物学行为。

关键词

鳖甲煎丸(BJJP) / 肝细胞癌(HCC) / 上皮-间充质转化(EMT) / 趋化素样因子超家族成员6(CMTM6) / 迁移 / 侵袭

基金资助

河北省自然科学基金项目(No.H2023209047,No.H2024209077); 河北省中央引导地方科技发展资金项目(No.246Z7720G); 河北省创新能力提升计划—高水平人才团队建设专项(No.205A7701H)