KLK4介导氟诱发成釉细胞凋亡的作用机制

刘晓静; 高美丽; 阮建平

西安交通大学学报（医学版） ›› 2024, Vol. 45 ›› Issue (6) : 918 -926.

刘晓静, 高美丽, 阮建平

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

摘要

目的探讨氟对成釉细胞中激肽释放酶4(kallikrein-4,KLK4)表达和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的氟化钠(NaF)处理ALC细胞24 h、48 h, qRT-PCR和Western blotting检测KLK4 mRNA及蛋白表达；CCK-8检测细胞相对活力；流式细胞术、Hoechst 33342染色检测氟对细胞周期和细胞凋亡的影响；Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、真核生物起始因子2a(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)、激活转录因子-4(activating transcription factor 4,ATF4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)的蛋白表达。结果 1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h、48 h后，与对照组(0 mmol/L NaF)相比，KLK4 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h、48 h后，漂浮细胞增加，其中2.0 mmol/L NaF组细胞相对活力降低，与对照组相比，差异具有统计学意义(P<0.05)。NaF处理细胞24 h后，与对照组相比，0.1、1.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例降低，S期细胞比例升高(P<0.05),2.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例升高，S期细胞比例降低(P<0.05);NaF处理细胞48 h后，与对照组相比，2.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例升高，G2/M期细胞比例降低(P<0.05)。随着NaF处理浓度的升高，亮蓝色的细胞数量逐渐增多，细胞凋亡率也依次升高，除了0.1 mmol/L NaF 24 h处理组外，其余氟浓度处理组细胞凋亡率与对照组相比，差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比，0.1、1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h后，GRP78和p-eIF2α蛋白表达升高(P<0.05)。与对照组相比，1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h, ATF4和CHOP蛋白表达升高(P<0.05),0.1、1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞48 h, ATF4和CHOP蛋白表达升高(P<0.05)。结论 NaF可能通过上调GRP78表达，激活eIF2α/ATF4/CHOP信号通路，从而引起KLK4表达抑制，诱发ALC细胞生长异常。