线粒体未折叠蛋白反应在棕榈酸诱导肾小管上皮细胞脂质聚集中的作用

摘要

目的 探讨线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein reaction, UPR^mt)对肾小管上皮细胞（human kidney 2,HK-2）脂代谢的影响。方法 采用棕榈酸（palmitic acid, PA）诱导HK-2细胞内脂质聚集，分别予siRNA抑制UPR^mt或巴多索隆（the 2-cyano-3,12-dioxooleana-1,9-dien-28-oic acid, CDDO）增强UPR^mt。油红染色观察细胞内脂质聚集情况，线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）测定线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential, MMP）,Mito-SOX测定线粒体内活性氧（reactive oxygen species, ROS）含量，Western blotting检测HSP60、LONP1、CLPP、ACOX1、PPARα、PGC1α、CPT1α蛋白表达。结果 PA诱导HK-2细胞脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多及UPR^mt关键蛋白HSP60、LONP1表达降低；抑制UPR^mt可加剧PA导致的脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多，HSP60、LONP1表达进一步降低；增强UPR^mt可缓解PA导致的脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多以及HSP60、LONP1表达降低。结论 PA诱导的HK-2细胞脂质聚集可能与线粒体功能障碍有关，UPR^mt在该过程中对HK-2细胞具有保护作用。

关键词

线粒体未折叠蛋白反应(UPR^mt) / 棕榈酸（PA） / 肾小管上皮细胞（HK-2） / 脂质聚集 / 活性氧（ROS）