NOL6介导核糖体生成调节内皮细胞功能障碍影响高血压进展的机制

摘要

目的 探讨核仁蛋白6(NOL6)在高血压发生和发展中的作用及其调控核糖体生成的机制。方法 基于GEO数据库(高血压相关的芯片数据集GSE212338)筛选差异表达基因，结合核糖体生成相关的基因进行交集分析获取高血压中核糖体生成相关基因。将大鼠分为对照(Control)组和模型组(L-NAME组),利用N-硝基L-精氨酸甲酯(L-NAME)诱导构建高血压大鼠模型，HE染色观察各组主动脉壁的厚度及病理变化。qPCR检测大鼠主动脉组织中核糖体RNA(rRNA)表达以反映核糖体生成情况，Western blotting检测NOL6蛋白表达。培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)并将细胞分组处理(Control组、AngⅡ组、AngⅡ+si-NC组、AngⅡ+si-NOL6组和AngⅡ+CX-5461组),EU检测HUVEC中新生RNA合成情况，Western blotting和qPCR检测HUVEC中NOL6蛋白和mRNA表达；Western blotting检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白表达。结果 结合GEO高血压数据集GSE212338的基因表达分析及核糖体生成基因集，鉴定出6个在高血压中表达显著改变且与核糖体生成相关的核心基因，其中NOL6差异最显著。L-NAME组大鼠主动脉壁厚度较Control组显著增加；rRNA表达显著上调，NOL6蛋白和mRNA表达显著上调。HUVEC实验中，AngⅡ组细胞的NOL6蛋白和mRNA、rRNA水平、新生RNA合成较Control组显著增加，较AngⅡ+si-NC组显著下调。与AngⅡ+si-NOL6组相比，AngⅡ+si-NC组和AngⅡ+CX-5461组细胞的NOL6蛋白及mRNA表达显著升高；与AngⅡ+si-NC组相比，AngⅡ+si-NOL6组和AngⅡ+CX-5461组的rRNA、新生RNA合成显著降低，eNOS及p-eNOS蛋白表达均显著增加。结论 NOL6与高血压中核糖体生成异常相关，NOL6可通过调控核糖体生成影响eNOS表达，进而调节高血压的发生和发展。

关键词

核仁蛋白6(NOL6) / 核糖体生成 / 高血压 / 内皮细胞 / 内皮型一氧化氮合酶(eNOS)

基金资助

新疆“天山英才”医药卫生高层次人才培养计划-领军人才项目(No.TSYC202301A057); 国家自然科学基金地区科学基金项目(No.8226020195)