SCRIB通过激活JAK-STAT3信号通路对胶质母细胞瘤增殖、凋亡和自噬的影响

摘要

目的 探讨SCRIB在胶质母细胞瘤（glioblastoma,GBM）增殖、凋亡及自噬过程中的作用及其潜在机制。方法 通过BEST(Biomarker Exploration of Solid Tumors)数据库分析SCRIB在GBM组织中的表达水平。采用慢病毒介导的shRNA干扰技术下调人GBM U87、U251细胞中SCRIB的表达，并将细胞分为阴性对照组（mock）和SCRIB shRNA干扰组（kd1、kd2），利用Western blotting(WB)和qPCR技术检测SCRIB的表达。通过流式细胞术（FCM）检测EdU掺入率及细胞凋亡率。利用CCK-8实验检测U87、U251细胞的增殖活力，并通过WB检测增殖相关蛋白的表达。利用细胞免疫荧光（IF）实验检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达，并进行多视野定量分析。利用WB检测LC3、p62及JAK-STAT3信号通路相关蛋白的表达。结果 与正常组织相比，GBM组织中SCRIB mRNA的表达水平显著上调（P<0.05）。FCM结果显示，SCRIB低表达的U87、U251细胞中，EdU掺入率显著降低（P<0.001），细胞凋亡率显著升高（P<0.001）。CCK-8实验结果表明，与mock组相比，SCRIB低表达组U87、U251细胞的增殖活力显著下降（P<0.001）。IF结果显示，SCRIB低表达组LC3的荧光聚集程度显著增强（P<0.001）,p62的荧光聚集程度显著降低（P<0.001）。WB结果显示，与mock组相比，SCRIB低表达组p27、LC3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平升高，而C-Myc、Cyclin D1、MCM、PCNA、p62蛋白表达水平下降，差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 SCRIB的低表达可能通过抑制JAK-STAT3信号通路，促进GBM细胞自噬、凋亡，进而抑制其增殖。

关键词

胶质母细胞瘤(GBM) / SCRIB / 增殖 / 凋亡 / 自噬 / JAK-STAT3

基金资助

河南省创新研发专项项目（No.HNGD2024005）