miR-101-5p通过靶向ATAD2抑制肺鳞癌细胞的侵袭

摘要

目的 探讨微小RNA-101-5p(miR-101-5p)影响肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma, LUSC)细胞增殖、侵袭的分子机制。方法 从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库下载肺鳞癌TCGA-LUSC的miRNA成熟体表达数据和总RNA的测序数据，鉴定差异表达基因；分析富集于ATAD2的信号通路。培养LUSC细胞，qRT-PCR检测细胞中miR-101-5p和ATAD2的mRNA表达，MTT实验、克隆形成实验和侵袭实验检测miR-101-5p对LUSC细胞增殖和侵袭的影响，流式细胞术检测ATAD2对LUSC细胞周期的影响，Western blotting检测ATAD2蛋白的表达。双荧光素酶实验验证miR-101-5p能否与ATAD2靶向结合，最后通过LUSC细胞共转染oe-ATAD2和miR-101-5p模拟物(mimic),检测细胞增殖、克隆、侵袭能力的变化，进一步探究miR-101-5p能否通过ATAD2调节LUSC细胞的生物学功能。结果 miR-101-5p在LUSC组织及培养LUSC细胞中显著下调。过表达miR-101-5p的LUSC增殖和侵袭能力显著抑制。其下游调控靶基因ATAD2在LUSC中显著上调，且miR-101-5p和ATAD2表达呈负相关，单基因富集分析(GSEA)结果显示ATAD2显著富集于细胞周期信号通路。双荧光素酶实验结果显示，miR-101-5p靶向结合ATAD2,并通过MTT和侵袭实验发现miR-101-5p通过靶向结合ATAD2调控LUSC细胞的增殖和侵袭。结论 miR-101-5p在LUSC中低表达，miR-101-5p通过靶向抑制ATAD2降低LUSC细胞的增殖、侵袭。

关键词

微小RNA-101-5p(miR-101-5p) / ATP酶家族AAA域(ATAD2) / 肺鳞癌(LUSC) / 增殖 / 侵袭