没药甾酮抑制二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化及机制

摘要

目的 探究没药甾酮(guggulsterone, GS)抑制二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine, DEN)诱导的大鼠肝纤维化及其作用机制。方法 构建DEN诱导的SD大鼠肝纤维化模型，将造模成功大鼠随机分为模型组(n=6)、GS组(n=6,50 mg/kg)和GS+SRI组(n=6,即GS 50 mg/kg+TGF-β1信号通路激活剂SRI 30 mg/kg),另设对照组(n=6),腹腔注射给药4周，其中对照组和模型组注射等量生理盐水。采用HE染色观察大鼠肝脏病理变化；全自动生化仪检测血清肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)水平；ELISA检测血清肝纤维化指标Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸酶(HA)、层粘连蛋白(LN)和氧化应激指标丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平；Real-time PCR和Western blotting检测TGF-β1、Smad2、p-Smad3/Smad3 mRNA和蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组可见肝纤维化的典型病理改变，GS组的肝纤维化病理改变明显减轻。与对照组相比，模型组血清ALB、GSH、SOD、CAT水平明显降低(P<0.05),血清ALT、AST、ALP、MDA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、HA、LN水平以及肝组织TGF-β1、Smad3 mRNA和TGF-β1、p-Smad3蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组相比，GS组血清ALB、GSH、SOD、CAT水平明显升高(P<0.05),血清ALT、AST、ALP、MDA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、HA、LN水平以及肝组织TGF-β1、Smad3 mRNA和TGF-β1、p-Smad3蛋白表达明显降低(P<0.05)。另外，给予TGF-β1信号通路激活剂SRI后，与GS组相比，GS+SRI组血清ALB、GSH、SOD、CAT水平明显降低(P<0.05),血清ALT、AST、ALP、MDA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、HA、LN水平以及肝组织TGF-β1、Smad3 mRNA和TGF-β1、p-Smad3蛋白表达明显升高(P<0.05),SRI减弱了GS对肝纤维化大鼠的抗纤维化效果。结论 GS对DEN诱导的大鼠肝纤维化有一定的抑制作用，其作用机制可能与降低氧化应激水平和抑制TGF-β1/Smad3信号通路激活有关。

关键词

没药甾酮 / 肝纤维化 / 氧化应激 / TGF-β/Smad信号通路

基金资助

陕西省自然科学基础研究计划项目(No.2023-JC-YB-770)