miR-125b通过Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞上皮间质转化和转移

摘要

目的 探讨miR-125b促进胃癌细胞侵袭、转移以及上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法 应用qRT-PCR检测miR-125b在胃癌组织及其相应的癌旁组织中的表达；胃癌细胞在上调或下调miR-125b时，Western blotting检测DKK3和SERPINA4的蛋白表达，双荧光素酶报告实验验证miR-125b能否与DKK3、SERPINA4靶向结合，MKN45细胞共转染miR-125b抑制物和靶基因siRNA,用迁移、侵袭实验观察miR-125b能否通过DKK3、SERPINA4调节MKN45细胞的生物学功能，并观察EMT相关转录因子表达；进一步通过慢病毒转染胃癌细胞上调或下调血清反应因子(SRF)表达并经尾静脉注射裸鼠后观察体内实验中肺转移瘤的数目，探讨SRF对胃癌细胞转移的影响。结果 qRT-PCR结果显示miR-125b在胃癌组织的表达上调，且与临床分期和淋巴结转移相关。双荧光素酶报告实验显示DKK3和SERPINA4是miR-125b在胃癌细胞中的直接靶点，并激活Wnt/β-catenin信号通路，进而促进EMT相关转录因子Twist1和Slug的转录，诱导EMT的发生，促进胃癌转移。体内体外实验证实转录因子SRF通过正向调节miR-125b的表达促进胃癌细胞的侵袭转移。结论 SRF/miR-125b轴促进了胃癌细胞的EMT和转移，这些调节因子有望成为胃癌新的潜在治疗靶点或生物标志物。

关键词

胃癌 / 上皮间质转化(EMT) / 转移 / miR-125b / Wnt/β-catenin

基金资助

陕西省自然科学基础研究计划项目(No.2019JQ-967)