脂多糖激活LRG1/ROCK1信号轴调控中性粒细胞炎症反应

摘要

目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)调控富含亮氨酸α-2糖蛋白1(leucine-rich α-2 glycoprotein 1, LRG1)/Rho相关蛋白激酶(Rho-associated protein kinase, ROCK1)信号轴在中性粒细胞炎症反应中的作用。方法 1μmol/L全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)和12.5 mL/L二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)联合诱导人早幼粒白血病HL-60细胞72 h和96 h后，Wright-Giemsa染色观察细胞形态学变化；流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的表达变化。LPS诱导dHL-60细胞和健康人外周血中性粒细胞活化，qPCR和ELISA法分别检测LRG1、ROCK1以及炎性因子的转录和分泌水平；采用Western blotting法检测dHL-60细胞活化后LRG1、ROCK1的蛋白表达；使用重组蛋白LRG1和ROCK1抑制剂Y-27632处理dHL-60细胞，qPCR检测ROCK1和炎性因子的转录水平。结果 在LPS刺激下，中性粒细胞活化，LRG1、ROCK1表达水平显著增加，伴随炎性因子转录水平明显升高；使用重组蛋白LRG1体外刺激dHL-60细胞，ROCK1及炎性因子的转录显著上调；使用ROCK1抑制剂Y-27632,炎性因子水平显著降低。结论 LPS可激活LRG1/ROCK1信号轴促进中性粒细胞炎性因子的生成，加剧炎症反应。

关键词

脂多糖(LPS) / 中性粒细胞 / LRG1 / ROCK1 / 炎症反应

基金资助

国家自然科学基金资助项目(No.81971179); 江苏省自然科学基金项目(No.BK20231347); 徐州市科技创新专项基金项目(No.KC23242)